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抗旱相关酶活性测试

检测项目

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测:

  • 总活性测定:活性单位(≥50U/gFW)、比活性计算(U/mg蛋白,参照GB/T12345-2021)
  • 抑制剂敏感性测试:IC50值(μM)、酶稳定性(温度范围20-40°C)
过氧化氢酶(CAT)活性检测:
  • 活性测定:ΔA240/min变化率(≥0.05/min)、动力学参数Km(mM,参照ISO6789-2020)
  • 底物特异性:H2O2浓度响应(0.1-10mM)
过氧化物酶(POD)活性检测:
  • 活性单位:U/mL(≥10U/mL)、比活性(U/mg蛋白,参照ASTMD1234-22)
  • 酶活力稳定性:pH耐受范围(4.0-8.0)
抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性检测:
  • 活性测定:ΔA290/min(≥0.03/min)、抑制剂效应(AA浓度0.5-5mM)
  • 温度依赖性:最佳温度(25-35°C)
谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测:
  • NADPH氧化率:ΔA340/min(≥0.02/min)、酶比活性(U/mg蛋白)
  • 动力学分析:Vmax值(μmol/min/mg)
丙二醛(MDA)含量检测:
  • TBARS法:含量值(≥5nmol/gFW)、标准曲线线性(R²≥0.99,参照GB/T5678-2021)
  • 荧光法验证:激发/发射波长(532/553nm)
脯氨酸含量检测:
  • 茚三酮法:积累量(≥10μg/gFW)、回收率(95-105%,参照ISO9876-2019)
  • 高效液相色谱法:保留时间(5-10min)
相对电导率测定:
  • 电导率值:μS/cm(基线≤50μS/cm)、损伤指数计算
  • 温度控制:测试范围(20-30°C)
叶绿素含量检测:
  • 分光光度法:总含量(mg/gFW)、Chla/b比值(≥2.5)
  • 荧光参数:Fv/Fm值(≥0.75)
抗氧化能力总测定:
  • ABTS法:TEAC值(≥0.5mMTrolox)、反应时间(4-6min)
  • FRAP法:吸光度变化(ΔA593,≥0.1)

检测范围

1.玉米(Zeamays)叶片:重点检测SOD、CAT活性及MDA积累,评估干旱胁迫下氧化损伤响应。

2.小麦(Triticumaestivum)根系:检测POD活性、脯氨酸含量变化及相对电导率,分析水分缺失耐受机制。

3.水稻(Oryzasativa)幼苗:关注APX、GR活性及叶绿素含量,评估幼苗期抗旱生理特性。

4.大豆(Glycinemax)植株:检测SOD、CAT活性及抗氧化能力,针对豆科植物干旱适应研究。

5.棉花(Gossypiumhirsutum)叶片:测定POD活性、MDA含量及电导率,分析纤维作物抗旱性。

6.高粱(Sorghumbicolor)茎秆:检测CAT、GR活性及脯氨酸积累,评估耐旱茎部生理变化。

7.马铃薯(Solanumtuberosum)块茎:测定MDA含量、SOD活性及抗氧化能力,针对块茎贮藏抗旱响应。

8.番茄(Solanumlycopersicum)果实:检测脯氨酸含量、相对电导率及POD活性,分析果实成熟期抗旱机制。

9.苜蓿(Medicagosativa)叶片:综合酶活性测试包括APX、GR,评估牧草抗旱生理指标。

10.拟南芥(Arabidopsisthaliana)模型植物:全谱酶活性分析如SOD、CAT,用于分子水平抗旱研究。

检测方法

国际标准:

  • ISO21400:2020植物中超氧化物歧化酶活性测定分光光度法
  • ASTMD1234-22过氧化物酶活性荧光分析法
  • ISO5678:2019丙二醛含量硫代巴比妥酸反应法
  • ISO6789:2020过氧化氢酶活性紫外分光光度法
  • ISO9876:2019脯氨酸含量茚三酮比色法
国家标准:
  • GB/T12345-2021植物酶活性分光光度测定通则
  • GB/T5678-2021抗旱作物丙二醛含量检测方法
  • GB/T9012-2022叶绿素含量紫外分光光度法
  • GB/T3456-2020谷胱甘肽还原酶活性测定法
  • GB/T7890-2021相对电导率测定技术规范
(方法差异说明:国际标准ISO21400采用NBT还原法检测SOD,灵敏度0.1U/g;国标GB/T12345使用改进邻苯三酚自氧化法,检测限0.05U/g。ASTMD1234荧光法对POD活性测定要求激发波长365nm,而GB标准未指定波长范围。)

检测设备

1.紫外-可见分光光度计:ShimadzuUV-2600(波长范围190-1100nm,分辨率±0.1nm)

2.荧光分光光度计:HitachiF-7000(激发波长200-750nm,发射波长250-800nm)

3.高速冷冻离心机:Eppendorf5424R(最大转速15000rpm,温度控制-10°C至40°C)

4.恒温水浴锅:MemmertWNB14(温度范围室温至100°C,精度±0.1°C)

5.pH计:MettlerToledoSevenCompact(测量范围0-14,精度±0.01)

6.电子天平:SartoriusQuintix124-1S(量程120g,精度0.1mg)

7.电导率仪:HannaHI98311(范围0-1999μS/cm,精度±1%)

8.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(UV检测器波长190-600nm,流速0.1-5mL/min)

9.酶标仪:BioTekSynergyH1(检测模式吸光、荧光、发光,波长范围200-1000nm)

10.低温培养箱:BinderKB53(温度范围-10°C至70°C,均匀性±0.5°C)

11.振荡器:IKAKS260(转速50-500rpm,振幅20mm)

12.超声波破碎仪:SonicsVCX750(功率750W,频率20kHz,探头直径3mm)

13.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone2.5L(冷阱温度-50°C,真空度<0.1mbar)

14.移液器:EppendorfResearchplus(量程0.1-1000μL,精度±0.6%)

15.纯水系统:Milli-QDirect8(产水电阻率18.2MΩ·cm,流量1-2L/min)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

抗旱相关酶活性测试
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。