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干旱胁迫下细胞膜稳定性检测

检测项目

膜通透性指标:

  • 电解质渗透率:相对电导率(%)、绝对电导率(μS/cm·gFW,参照ISTA7-015)
  • 溶质泄漏量:氨基酸渗出量(μg/gFW)、糖类渗出量(μmol/gFW)
膜脂过氧化检测:
  • 氧化产物:丙二醛含量(nmolMDA/gFW,TBARS法)、羰基化蛋白(nmolDNPH/mgprot)
  • 抗氧化酶:超氧化物歧化酶活性(SOD,U/mgprot)、过氧化氢酶活性(CAT,μmolH₂O₂/min·mg)
膜脂组分分析:
  • 脂肪酸构成:饱和脂肪酸比例(SFA%)、不饱和度指数(IU=Σ[%MUFA×1+%PUFA×2.5])
  • 磷脂含量:磷脂酰胆碱(PCμg/gDW)、磷脂酰乙醇胺(PEμg/gDW)
膜功能蛋白活性:
  • 离子转运体:质膜H⁺-ATPase活性(μmolPi/h·mgprot)、液泡膜焦磷酸酶活性(PPase,μmolPi/h·mg)
  • 水通道蛋白:质膜内在蛋白(PIPs)丰度(Westernblot灰度值)
膜流动性测定:
  • 荧光探针:DPH偏振度(P值)、荧光恢复率(FRAP%)
  • 电子顺磁共振:序参数(S值,参照ISO16362)
膜修复能力评估:
  • 脂质合成酶:磷脂酶D活性(nmolPC/h·mg)、溶血磷脂酰转移酶(LPT,nmol/min·mg)
  • 膜融合蛋白:囊泡相关膜蛋白(VAMP)表达量(ELISAng/mgprot)
膜电位监测:
  • 极化状态:跨膜电位差(mV,微电极法)、质子梯度(ΔpH)
膜损伤形态学:
  • 超微结构:质膜皱缩指数(TEM图像分析)、脂筏完整性(共聚焦观测)
胁迫响应蛋白:
  • 热激蛋白:HSP70表达量(RT-qPCR相对表达量)、小分子热激蛋白(sHSPs)累积量
膜保护物质:
  • 渗透调节剂:脯氨酸含量(μg/gFW)、甜菜碱浓度(μmol/gDW)

检测范围

1.禾本科作物:小麦/玉米/水稻叶片及根系,重点检测SOD活性与离子渗漏率相关性

2.豆科植物:大豆/菜豆根瘤细胞膜,侧重H⁺-ATPase活性与固氮效率关联

3.经济林木:柑橘/苹果叶肉细胞,聚焦膜脂不饱和度与抗脱水能力

4.荒漠植物:柽柳/沙棘表皮细胞,测定角质层脂质重组动态

5.园艺作物:番茄/辣椒果实细胞膜,评估MDA积累与贮藏褐变关系

6.油料作物:油菜/向日葵种子,分析贮藏期膜脂过氧化程度

7.药用植物:甘草/黄芪根皮层细胞,检测膜结合次生代谢物渗出量

8.花卉植物:月季/菊花花瓣质膜,量化花青素膜稳定性与褪色关联

9.苔藓地衣:荒漠结皮生物膜,测定胞外多糖对膜保护效应

10.藻类培养物:小球藻/螺旋藻细胞膜,监控光氧化损伤程度

检测方法

国际标准:

  • ISO11805:2018植物组织电导率测定规程
  • ISTA7-015电解质渗出率标准分析法
  • AOCSCd8b-90脂肪酸甲酯化气相色谱法
  • IFCC1984酶活性测定通则(ATPase/PPase)
国家标准:
  • GB/T35814-2018植物丙二醛含量测定(分光光度法)
  • GB/T38571-2020植物细胞膜流动性荧光探针检测法
  • GB/T34800-2017蛋白质羰基含量测定(DNPH法)
  • NY/T3082-2017作物抗旱性鉴定技术规范(膜稳定性部分)
方法差异说明:GB/T35814采用532nm波长测定MDA,较ISO标准的550nm灵敏度提升40%;ATPase活性测定中IFCC要求37℃而NY/T3082采用25℃生理温度

检测设备

1.多功能电导仪:METTLERTOLEDOSevenExcellence(分辨率0.01μS/cm,温控±0.1℃)

2.紫外分光光度计:ShimadzuUV-2700(波长范围190-900nm,带宽≤0.3nm)

3.气相色谱仪:Agilent8890(FID检测器,检出限≤0.1ppm)

4.荧光偏振系统:HoribaPTIQuantaMaster(偏振精度±0.005P)

5.超速离心机:BeckmanOptimaXPN-100(最大转速100,000rpm)

6.酶标分析系统:ThermoVarioskanLUX(检测波长200-1000nm)

7.冷冻切片机:LeicaCM1950(切片厚度1-100μm)

8.透射电镜:HitachiHT7800(分辨率0.2nm)

9.共聚焦显微镜:ZeissLSM900(Z轴分辨率0.3μm)

10.膜片钳系统:HEKAEPC10USB(电流分辨率0.1pA)

11.实时荧光定量PCR:Bio-RadCFX96(温度均一性±0.2℃)

12.电子顺磁共振仪:BrukerEMXmicro(磁场稳定度±0.01%)

13.脂质提取工作站:BUCHIB-811(溶剂回收率≥99%)

14.蛋白印迹系统:Bio-RadTrans-BlotTurbo(转印效率95%)

15.渗透胁迫培养箱:SANYOMLR-352H(湿度控制范围10-98%RH)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

干旱胁迫下细胞膜稳定性检测
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。