检测项目

致病菌鉴定：

• 沙门氏菌检测：血清型分型（O抗原、H抗原）、毒力基因筛查（invA、spvC，参照ISO 6579）
• 大肠杆菌检测：O157:H7特异性基因（stx1、stx2）、生物膜形成能力（OD600值≥0.5）

耐药基因筛查：

• β-内酰胺酶基因：blaTEM、blaCTX-M（检出限≤1×10^3 copies/g，灵敏度≥95%）
• 氨基糖苷类耐药基因：aac(6')-Ib、aadA（相对表达量±0.5 log值，参照ISO 20776-1）

抗生素敏感性测试：

• 最小抑菌浓度（MIC）：氨苄西林（MIC≤8μg/mL）、庆大霉素（MIC≤4μg/mL）
• 耐药表型分析：抑菌圈直径（≥15mm为敏感，参照CLSI M100）

分子生物学检测：

• PCR扩增：目标基因片段长度（100-500bp）、循环数（35±2 cycles）
• 实时荧光定量：Ct值阈值（≤30）、扩增效率（90%-110%）

微生物计数：

• 总菌落计数：CFU/g（检出限≤10 CFU/g）、致病菌比例（≥1%）
• 厌氧菌检测：梭菌属特异性基因（tcdA、tcdB，生长温度37±1°C）

基因表达分析：

• 耐药基因表达量：相对定量（fold change≥2）、内参基因（gapdh、16S rRNA）
• 转录组测序：覆盖深度（≥50x）、差异表达基因（p≤0.05）

质粒检测：

• 质粒携带率：耐药基因载体（如IncF、IncI1）、大小范围（2-200kb）
• 接合转移能力：转移频率（≥10^-6）、受体菌株（E. coli DH5α）

生物安全检测：

• 内毒素水平：EU/g（≤0.25 EU/g）、致病风险评级（等级1-4）
• 病原体灭活验证：热处理效果（80°C×10min存活率≤0.1%）

样品前处理：

• DNA提取：纯度（A260/A280=1.8-2.0）、浓度（≥20ng/μL）
• 样品均质化：粒径分布（≤100μm）、均质时间（3±0.5min）

质量控制检测：

• 阳性对照：标准菌株（ATCC 25922）、回收率（85%-115%）
• 阴性对照：无菌水空白、假阳性率（≤1%）

检测范围

1. 猪肝脏粉： 重点筛查沙门氏菌耐药基因（blaTEM、mecA）和抗生素残留关联，确保无交叉污染风险

2. 鸡内脏粉： 侧重大肠杆菌O157:H7毒力基因（stx1、stx2）及氨基糖苷类耐药性检测，评估饲料添加剂安全性

3. 牛肾脏粉： 针对梭菌属内毒素和β-内酰胺酶基因表达分析，监控生物膜形成影响

4. 鸭肠粉： 专注厌氧菌耐药质粒携带率（如IncF型），检测热处理灭活效果

5. 鱼内脏粉： 重点分析弧菌属耐药基因（ctxM、aadA）及海水盐度适应性检测

6. 羊胰腺粉： 侧重抗生素敏感性MIC测试，结合毒力基因invA筛查

7. 兔肝脏粉： 专注总菌落计数和耐药表型关联，评估储存期稳定性

8. 鹅心脏粉： 针对质粒接合转移频率检测，监控基因水平传播风险

9. 混合动物内脏粉： 侧重多种致病菌交叉耐药分析（如blaCTX-M与aac(6')-Ib），确保均质化代表性

10. 干燥内脏粉末： 专注水分活度（aw≤0.6）对耐药基因稳定性的影响检测

检测方法

国际标准：

• ISO 6579:2017 食品和动物饲料微生物学—沙门氏菌检测（采用实时PCR扩增）
• ISO 20776-1:2019 抗菌剂敏感性测试—肉汤微稀释法（MIC测定）
• ISO 22174:2005 食品微生物学—致病菌分子检测方法（PCR特异性验证）

国家标准：

• GB/T 4789.4-2016 食品微生物检验—沙门氏菌检验（侧重培养法分离）
• GB/T 34778-2017 饲料中微生物耐药基因检测方法（采用qPCR定量）
• GB/T 38164-2019 动物源性饲料安全要求（内毒素ELISA法）

方法差异说明：ISO标准优先使用分子技术（如PCR），强调高通量和自动化；GB标准常结合传统培养法（如沙门氏菌分离），对样品前处理要求更严格（如均质时间差异），国际标准检测限通常较低（如ISO PCR检出限比GB低10倍）

检测设备

1. 实时荧光定量PCR仪： ABI 7500型（检测通道：4个，温度精度±0.1°C）

2. 高通量测序仪： Illumina MiSeq型（读长：2×250 bp，通量：15M reads）

3. 微生物培养箱： Memmert IN260型（温度范围：20-60°C，均匀性±0.5°C）

4. 全自动核酸提取仪： QIAGEN Qiacube型（提取效率≥95%，样本通量：12个）

5. 电泳仪： Bio-Rad PowerPac型（电压范围：50-300V，凝胶分辨率：100bp）

6. 酶标仪： Thermo Multiskan FC型（波长范围：340-850nm，精度±1%）

7. 离心机： Eppendorf 5424R型（转速：0-15,000rpm，容量：24×1.5mL）

8. 恒温混匀器： Grant Bio PTR-60型（混合速度：100-1500rpm，温度控制±0.2°C）

9. 超低温冰箱： Thermo Forma 900系列（温度：-80°C，稳定性±1°C）

10. 生物安全柜： Esco Airstream型（气流速度：0.4m/s，洁净度Class II）

11. 分光光度计： Shimadzu UV-1800型（波长精度：±1nm，吸光度范围：0-3A）

12. 均质机： IKA T25型（转速：3,000-25,000rpm，处理量：100mL）

13. 恒温水浴锅： Julabo TW12型（温度精度：±0.1°C，容量：12L）

14. 厌氧培养系统： Don Whitley DG250型（氧气水平≤0.1%，温度范围：30-45°C）

15. 凝胶成像系统： Syngene GBox型（分辨率：5MP，灵敏度：0.1ng DNA）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。