树种遗传多样性评估
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文章概述:树种遗传多样性评估采用分子遗传学技术,核心检测对象为树木种群的DNA多态性和表型变异,关键项目包括微卫星标记(SSR)多态性分析、单核苷酸多态性(SNP)检测、等位基因频率计算、遗传距离测量、近交系数评估、基因流分析、多样性指数(如Shannon指数)计算、适应性性状遗传评估、种群结构解析和保护遗传学指标量化,旨在为种质资源保护、育种策略和生态恢复提供数据支持。
检测项目
分子标记分析:
- SSR标记多态性:等位基因数(≥10个)、观测杂合度(Ho≥0.6,参照ISO20123)
- AFLP片段分析:多态位点百分比(PPL≥70%)、遗传相似系数(GS≥0.85)
- ISSR标记检测:条带多态性比率(≥80%)、标记指数(MI≥0.5)
- SNP检测:变异位点密度(≥1/100bp)、最小等位基因频率(MAF≥0.05)
- 基因序列比对:同源性百分比(≥95%)、插入缺失变异(Indel≤5bp)
- mtDNA测序:单倍型多样性(Hd≥0.8)、核苷酸多样性(π≥0.005)
- 树高变异:标准差(σ≤2.5m)、遗传力(h²≥0.3)
- 叶形指数:长宽比(1.5-3.0)、变异系数(CV≤15%)
- 花果性状:开花期离散度(≤10天)、果实大小遗传偏差(±5mm)
- F-statistics计算:Fst值(0.05-0.25)、Fit指数(≥0.1)
- 基因流估计:Nm值(≥1.0)、迁移率(m≥0.01)
- 聚类分析:遗传距离(D≤0.2)、主成分贡献率(PC1≥20%)
- Shannon指数:I≥1.5(参照GB/T35822)
- Simpson指数:D≥0.7、均匀度指数(J≥0.8)
- 等位基因丰富度:Ar≥5.0、私有等位基因数(PA≥2)
- 近交系数:Fis值(-0.2至0.2)、亲缘系数(r≥0.125)
- 杂交指数:HI≥0.5、基因渗入率(≤10%)
- 杂合子缺失:检测率(≤5%)、偏离Hardy-Weinberg平衡(P≥0.05)
- 抗病基因多样性:抗性等位基因频率(≥0.3)、QTL效应值(R²≥0.1)
- 耐逆性状:胁迫响应基因表达量(foldchange≥2)、遗传增益(ΔG≥5%)
- 生长性状遗传:年轮宽度遗传率(h²≥0.4)、相关性系数(r≥0.6)
- 有效种群大小:Ne≥50、瓶颈效应检测(P≥0.05)
- 灭绝风险评估:遗传多样性损失率(≤10%)、奠基者效应指数(≤0.1)
- 迁地保护评估:基因库代表性(≥80%)、繁殖群体有效大小(≥100)
- 高通量测序:覆盖度(≥30x)、测序错误率(≤0.1%)
- 毛细管电泳:片段大小精度(±1bp)、峰值高度变异(CV≤10%)
- 芯片杂交:信号强度(≥1000RFU)、callrate(≥95%)
- 遗传软件输出:Fst置信区间(95%CI)、bootstrap支持率(≥70%)
- 模型拟合:AIC值(≤-100)、似然比检验(P≤0.01)
- 可视化输出:树状图cophenetic相关性(≥0.8)、PCA方差解释率(≥60%)
检测范围
1.针叶树种:包括松属(Pinus)、杉木属(Cunninghamia)等,检测重点为抗病基因多样性和生长适应性遗传变异,适用于林业育种和生态修复。
2.阔叶树种:涵盖栎属(Quercus)、杨属(Populus)等,侧重花果性状遗传分析和基因流评估,用于种质资源保护和杂交育种。
3.经济果树种:如苹果(Malusdomestica)、柑橘(Citrusreticulata),重点检测果实品质遗传多样性和抗逆基因频率,支撑果园管理品种选育。
4.濒危保护树种:包括红豆杉(Taxuschinensis)、水杉(Metasequoiaglyptostroboides),核心项目为有效种群大小和遗传瓶颈检测,用于conservation策略制定。
5.外来入侵树种:如桉树(Eucalyptus)、刺槐(Robiniapseudoacacia),检测基因渗入率和适应性进化,评估生态风险。
6.乡土树种:涵盖地域特异性树种如樟树(Cinnamomumcamphora),重点分析遗传结构本地适应性和多样性指数,用于生态恢复项目。
7.杂交树种:如杂交杨(Populus×euramericana),检测杂种优势遗传基础和亲本贡献率,优化育种程序。
8.古树名木:包括千年银杏(Ginkgobiloba),侧重年龄相关遗传衰退和克隆多样性,支持文化遗产保护。
9.速生用材树种:如杉木(Cunninghamialanceolata),核心检测生长性状遗传力和木材品质关联分析,用于工业林业。
10.生态先锋树种:如沙棘(Hippophaerhamnoides),重点评估基因流和繁殖系统多样性,应用于荒漠化防治。
检测方法
国际标准:
- ISO20123:2018分子标记分析中的SSR检测方法
- ISO21945:2020植物遗传多样性评估的SNP分型技术
- ISO14892:2021DNA测序质量控制和数据解读规范
- ISO17375:2019种群遗传结构分析的F-statistics计算
- ISO20089:2017遗传多样性指数(Shannon/Simpson)测定方法
- GB/T35822-2018林木遗传多样性检测技术规范
- GB/T35823-2018植物DNA提取和纯化方法
- GB/T35824-2018微卫星标记多态性分析标准
- GB/T35825-2018遗传距离和基因流计算方法
- GB/T35826-2018保护遗传学有效种群大小评估
检测设备
1.实时荧光定量PCR仪:ABI7500Fast型(检测通道5个,温度精度±0.1°C)
2.毛细管电泳系统:ABI3500xlGeneticAnalyzer(片段分析范围50-1000bp,分辨率1bp)
3.高通量测序仪:IlluminaNovaSeq6000(读长2x150bp,通量6Tb/run)
4.核酸提取仪:QIAGENQiacubeHT(处理样本96孔/次,交叉污染率≤0.01%)
5.紫外分光光度计:NanoDropOnec(检测范围2ng/μL-15000ng/μL,波长260/280nm)
6.凝胶成像系统:Bio-RadChemiDocMP(像素5MP,检测限0.1ngDNA)
7.恒温扩增仪:BioerLifeProFlex(温控范围4-99°C,升降温速率3°C/s)
8.生物分析仪:Agilent2100Bioanalyzer(芯片类型DNA/RNA,精度±5%CV)
9.超低温冰箱:ThermoScientificForma900系列(温度-86°C,容积900L)
10.离心机:EppendorfCentrifuge5430R(最大转速14500rpm,容量4x100mL)
11.电子天平:SartoriusCubisII(量程0.001g-220g,精度±0.1mg)
12.超净工作台:EscoClassIIA2型(风速0.3-0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)
13.振荡器:IKAKS4000iccontrol(转速50-1500rpm,负载5kg)
14.水浴锅:MemmertWNB系列(温控精度±0.1°C,容量30L)
15.数据服务器:DellPowerEdgeR740(处理器IntelXeon,存储100TBRAID)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。