检测项目

基因组靶标检测：

• 属特异性基因：invA基因（参照ISO/TS6579-2:2020）、ttrRSBCA操纵子
• 血清型鉴定：O抗原（rfbJ,fliC）、H抗原（fljB）特异性基因

毒力因子分析：

• 肠毒素基因：stn（沙门菌肠毒素）
• 质粒毒力基因：spvR/spvB（毒力质粒调控因子）
• 侵袭蛋白：sipB/sipC（III型分泌系统效应蛋白）

耐药基因筛查：

• β-内酰胺酶：blaTEM、blaCTX-M（检出限≤10copies/μL）
• 喹诺酮耐药：qnrS、gyrA突变（S83L位点）
• 四环素耐药：tet(A)、tet(B)

定量检测：

• 实时荧光定量PCR：绝对定量（copies/g），标准曲线R²≥0.99
• 数字PCR：单分子计数，置信区间95%

样本处理控制：

• 内部扩增控制（IAC）：人工合成竞争序列（Ct值范围28±2）
• 提取效率监控：外源性DNA添加回收率≥70%

交叉污染验证：

• 阴性对照：全过程空白样本（无模板对照）
• 环境监控：气溶胶检测（气溶胶捕获装置比对）

引物探针验证：

• 特异性：非目标菌株（大肠杆菌O157等）无交叉反应
• 灵敏度：检测限（LOD）≤10CFU/PCR反应体系

扩增程序优化：

• 退火温度梯度：55-65℃（±0.3℃温控精度）
• 循环数控制：≤45cycles（防非特异性扩增）

产物分析：

• 熔解曲线分析：Tm值偏差≤0.5℃（SYBRGreen法）
• 电泳验证：预期片段大小±10bp（2%琼脂糖凝胶）

数据判读：

• 阳性判定：Ct值≤40且扩增曲线呈S型
• 灰区样本：40

检测范围

1.生鲜肉类：猪牛羊禽肉及其内脏，重点检测屠宰加工过程交叉污染，需检测沙门氏菌载量（CFU/g）

2.禽蛋制品：鲜蛋、液蛋及蛋粉，针对肠炎沙门氏菌（S.Enteritidis）进行特异性引物检测

3.乳制品：生乳、奶酪及冰淇淋，监控巴氏杀菌后存活菌的应激基因（rpoS）表达

4.水产及制品：养殖鱼类、贝类及即食海产品，侧重检测水媒传播血清型（如S.ParatyphiB）

5.果蔬类：鲜切果蔬及芽苗菜，针对灌溉污染检测鼠伤寒沙门氏菌（S.Typhimurium）

6.谷物制品：面粉、谷物早餐，重点检测低水分活度下的菌体存活基因（treA）

7.预制食品：即食餐食、三明治，需同步检测多重耐药基因（MDR）谱系

8.调味品原料：辣椒粉、芝麻等香辛料，富集后检测热损伤菌体（dnaK基因修复）

9.食品接触材料：加工设备表面拭子，采用环境样本专用核酸提取试剂盒

10.婴幼儿食品：配方奶粉及辅食，执行≤0CFU/25g的限量标准检测

检测方法

国际标准：

• ISO/TS6579-2:2020食品和动物饲料微生物学-沙门氏菌检测-第2部分：实时PCR法
• FDABAMChapter5:Salmonella（2023修订版）分子检测附录
• AOACOfficialMethod2013.09食品中沙门氏菌实时PCR法

国家标准：

• GB4789.31-2013食品微生物学检验沙门氏菌PCR检测
• SN/T5364.1-2021出口食品中致病菌检测方法PCR-第1部分：沙门氏菌
• GB4789.4-2016沙门氏菌检验（分子生物学方法补充件）

方法差异说明：ISO标准要求双重靶基因（invA+ttr）确认，GB标准接受单靶标（invA）阳性；FDABAM规定预增菌时间≥18h，SN/T标准允许8h短时增菌；AOAC方法强制使用内部扩增控制（IAC），而国标中为推荐项。

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：QuantStudio7Pro（温控精度±0.1℃，6通道荧光检测）

2.自动化核酸提取系统：QIAcubeHT（通量96样本/批次，磁珠法回收率≥95%）

3.梯度PCR仪：T100ThermalCycler（升降温速率5℃/s，热盖压力可调）

4.电泳系统：Sub-CellGT（电压范围5-300V，兼容琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶）

5.紫外凝胶成像仪：GelDocXR+（1600万像素CCD，灵敏度0.1ngDNA）

6.高速离心机：Microfuge20R（最大RCF20,000×g，转子适配0.2mL管）

7.生物安全柜：ClassIIA2型（气流模式30%外排，HEPA过滤效率99.99%）

8.超低温冰箱：Forma900（温度范围-86℃±3℃，4小时断电保护）

9.超纯水系统：Milli-QIQ7000（电阻率18.2MΩ·cm，TOC≤1ppb）

10.微量分光光度计：NanoDropOne（检测范围2-27,000ng/μLdsDNA）

11.振荡金属浴：ThermoMixerC（振荡速度300-1500rpm，温控范围-10℃-100℃）

12.移液器校准系统：GravimetricCalibration（量程0.1-1000μL，精度±0.1%）

13.气溶胶监测仪：PCRContaminationDetector（检测限10copies/m³空气）

14.数字PCR系统：QX200DropletDigitalPCR（分区数20,000滴/样本）

15.自动化液体工作站：Biomeki5（移液精度±1%，支持96/384孔板操作）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。