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食品中李斯特氏菌检测

检测项目

微生物学检测:

  • 菌落计数:CFU/g(参照ISO 11290-1),检出限≤10 CFU/g
  • 生化鉴定:API Listeria试剂盒,鉴定准确率≥95%
  • 选择性培养基培养:牛津琼脂培养,生长抑制率≥99%

分子生物学检测:

  • PCR检测:特异性基因靶点(hlyA、inlA),扩增效率≥90%
  • 实时荧光定量PCR:检测限10^2 CFU/g,Ct值≤35
  • 基因测序:16S rRNA序列分析,比对准确度±0.01%

血清型检测:

  • 血清分型:1/2a、1/2b等血清型,参照FDA BAM方法
  • 凝集试验:玻片凝集反应,灵敏度≥98%

抗生素敏感性检测:

  • MIC测定:最小抑菌浓度(如氨苄西林≤2μg/mL),参照CLSI M45标准
  • 纸片扩散法:抑菌圈直径≥15mm

环境监测检测:

  • 表面擦拭采样:回收率≥80%,参照ISO 18593
  • 空气采样:CFU/m³计数,检测限≤1 CFU/m³

快速检测技术:

  • 免疫层析法:胶体金试纸条,检测时间≤24h,灵敏度≥95%
  • 酶联免疫吸附试验:OD值≥0.5,参照AOAC 2003.13

毒素检测:

  • 溶血素检测:溶血活性测定,溶血圈直径≥5mm
  • 内毒素测试:LAL法,检测限0.01 EU/mL

遗传分析检测:

  • 脉冲场凝胶电泳:分子分型,分辨率≥95%
  • 多位点序列分型:MLST方案,ST型别鉴定

质量控制检测:

  • 阳性对照:ATCC 19115菌株,生长符合率100%
  • 阴性对照:无菌缓冲液,无假阳性率

生理特性检测:

  • 温度耐受性:4°C生长测试,生长率≥50%
  • pH耐受性:pH 5.0-9.0范围,存活率≥80%

检测范围

1. 乳制品:包括牛奶、奶酪和酸奶,检测重点为加工后二次污染及冷藏链控制,确保菌落计数≤100 CFU/g。

2. 肉类产品:涵盖熟肉、香肠和火腿,检测重点为储存温度影响和表面交叉污染,监控李斯特氏菌血清型分布。

3. 水产品:如鱼、虾和贝类,检测重点为生鲜环节污染源及冷冻解冻过程,强调PCR快速筛查。

4. 蔬菜水果:包括沙拉、生菜和浆果,检测重点为清洗消毒效果及农残影响,确保生化鉴定准确。

5. 即食食品:如三明治、便当,检测重点为保质期控制和包装密封性,目标检出限≤10 CFU/g。

6. 婴儿食品:涵盖奶粉和辅食,检测重点为零检出要求及原料溯源,使用高灵敏度分子方法。

7. 冷冻食品:如冰淇淋、冷冻蔬菜,检测重点为解冻过程细菌复活及温度波动,监控CFU计数。

8. 罐头食品:包括蔬菜罐头和肉酱,检测重点为密封灭菌验证及储存稳定性,侧重毒素检测。

9. 调味品:如酱料、醋,检测重点为添加剂抑制效果及pH耐受性,确保血清分型准确。

10. 宠物食品:涵盖干粮和湿粮,检测重点为动物源污染及抗生素残留,使用环境监测方法。

检测方法

国际标准:

  • ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp.
  • ISO 11290-2:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of Listeria monocytogenes
  • AOAC 2003.13 Listeria monocytogenes in selected foods

国家标准:

  • GB 4789.30-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 李斯特氏菌检验
  • GB/T 4789.36-2008 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验
  • GB 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验(相关方法适用)

(方法差异说明:ISO标准优先使用ChromID琼脂,培养温度30°C;GB标准采用PALCAM琼脂,培养温度37°C,影响菌落形态识别。国际PCR方法多靶点基因,国标侧重单一hlyA检测。)

检测设备

1. 微生物培养箱:Heratherm型(温度范围0-60°C,精度±0.5°C)

2. PCR仪:CFX96型(96孔板设计,温度梯度±0.1°C)

3. 酶标仪:EnVision型(波长范围200-1000nm,检测精度±1%)

4. 离心机:5810R型(最高转速15,000rpm,容量4×100mL)

5. 生物安全柜:Airstream型(Class II A2,气流速度0.5m/s)

6. 显微镜:CX43型(放大倍数40-1000x,分辨率0.2μm)

7. 自动菌落计数器:ProtoCOL型(计数精度±1%,图像分析速度≤5s)

8. 荧光定量PCR系统:LightCycler 480型(4通道检测,动态范围10^1-10^9)

9. 电泳系统:PowerPac型(电压范围10-300V,运行时间1-24h)

10. 恒温水浴锅:WB22型(温度稳定性±0.1°C,容量20L)

11. 分光光度计:UV-1800型(波长精度±1nm,吸光度范围0-3A)

12. 真空抽滤装置:Millipore型(滤膜孔径0.45μm,流量≥100mL/min)

13. 移液器:Pipetman型(量程0.1-1000μL,精度±0.5%)

14. 低温冰箱:Haier型(温度-20°C至-80°C,均匀度±2°C)

15. 高压灭菌器:MLS-3750型(灭菌温度121°C,压力0.15MPa,时间15-30min)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

食品中李斯特氏菌检测
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。