LEA蛋白家族功能验证试验
检测项目
表达分析:
- 蛋白表达量:浓度(μg/mL)、纯度(≥95%)
- 基因表达水平:mRNA丰度(foldchange)
- 分子量:SDS-PAGE测定(kDa,参照ISO13994)
- 等电点:IEF分析(pI值)
- 热稳定性:变性温度(Tm值°C)
- 冷稳定性:冰点降低(ΔT°C)
- 脱水耐受:水分损失率(%,参照ISO21807)
- 离子结合能力:结合常数(Kd值)
- 抗氧化活性:自由基清除率(%)
- 酶保护效能:酶活性保留率(%)
- 盐胁迫响应:离子渗透率(%)
- 干旱模拟:相对电导率(μS/cm)
- 细胞存活率:MTT法测定(%)
- 膜完整性:脂质过氧化水平(nmol/mg)
- 蛋白-蛋白互作:结合亲和力(RU)
- DNA结合能力:迁移率变化(%)
- 二级结构:圆二色谱分析(α-螺旋比例%)
- 三级结构:荧光光谱(λmaxnm)
- 代谢物积累:可溶性糖含量(mg/g)
- 胁迫标记物:丙二醛浓度(μM)
- ELISA定量:灵敏度(pg/mL)
- WesternBlot:条带密度(AU)
检测范围
1.植物组织样本:涵盖叶片、根系及种子,重点检测LEA蛋白在自然胁迫下的积累动态及保护作用。
2.重组蛋白表达系统:包括大肠杆菌、酵母表达产物,侧重纯化后蛋白的功能活性及稳定性验证。
3.细胞培养模型:涉及哺乳动物及植物细胞系,重点评估LEA蛋白在模拟胁迫下的细胞保护机制。
4.转基因植物材料:涵盖过表达或敲除株系,检测LEA基因调控对逆境耐受性的影响。
5.微生物样本:包括细菌和真菌来源,侧重LEA蛋白在极端环境中的适应性功能。
6.体外合成蛋白:化学合成或体外翻译产物,重点分析结构-功能关系及体外活性。
7.胁迫处理样本:经干旱、盐或冷处理的生物材料,检测LEA蛋白响应动态及保护效率。
8.不同物种来源:包括拟南芥、水稻等模型植物,侧重跨物种LEA蛋白的功能保守性。
9.种子胚胎样本:晚期胚胎发育阶段,重点验证LEA蛋白在脱水耐受中的作用。
10.商业蛋白产品:纯化LEA蛋白制剂,检测批次一致性及功能活性指标。
检测方法
国际标准:
- ISO10993-5:细胞毒性测试(哺乳动物细胞模型)
- ISO21807:水分活性测定(脱水耐受试验)
- ISO13994:蛋白质分子量测定(SDS-PAGE法)
- ISO17025:实验室能力要求(通用质量保证)
- ISO148-1:冲击试验方法(适用于机械应力模拟)
- GB/T16886.5:医疗器械生物学评价(细胞毒性测试)
- GB/T5009.3:食品水分测定(脱水试验)
- GB/T14698:蛋白质含量测定(分光光度法)
- GB/T15403:离子结合常数测定(平衡透析法)
- GB/T19495.2:转基因产品检测(基因表达分析)
检测设备
1.实时荧光定量PCR仪:型号Q-PCR-7500(检测精度±0.5%,温度范围4-99°C)
2.紫外可见分光光度计:型号UV-VIS-2000(波长范围190-900nm,分辨率0.1nm)
3.高速离心机:型号Centri-5000(转速范围500-15000rpm,容量10×100mL)
4.SDS-PAGE电泳系统:型号Gel-Elec-100(电压范围50-300V,凝胶尺寸10×10cm)
5.蛋白纯化系统:型号Purif-800(流速0.1-10mL/min,压力范围0-5MPa)
6.热循环仪:型号Thermo-Cycle-96(温度精度±0.1°C,孔数96)
7.冷冻干燥机:型号Freeze-Dry-100(真空度0.1Pa,冷凝温度-80°C)
8.倒置显微镜:型号Micro-Scope-400(放大倍数40-1000x,分辨率0.2μm)
9.流式细胞仪:型号Flow-Cyto-200(检测速度10000细胞/秒,激光波长488nm)
10.酶标仪:型号ELISA-Reader-96(吸光度范围0-4OD,波长精度±1nm)
11.圆二色谱仪:型号CD-Spec-300(波长范围190-260nm,灵敏度0.1mdeg)
12.荧光光谱仪:型号Fluoro-Spec-500(激发波长200-800nm,检测限0.01μg/mL)
13.恒温振荡器:型号Shaker-150(转速50-300rpm,温度范围4-60°C)
14.电导率仪:型号Conduct-100(测量范围0-200mS/cm,精度±0.5%)
15.超低温冰箱:型号Freezer-80(温度范围-86°C,容积500L)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。