虹彩病毒科检测
检测项目
1.病毒核酸定性检测:靶向MCP基因保守区(引物序列:F:5'-CGCGGTACCATGTCTTAC-3';R:5'-GCTCTAGATTACTTGTCC-3'),扩增产物532bp
2.病毒载量定量分析:采用TaqMan探针法(探针序列:FAM-5'-CGCACCGCCGCGTT-3'-BHQ1),灵敏度≥10copies/μL
3.主要衣壳蛋白(MCP)抗原检测:ELISA法测定阈值OD450≥0.35判定阳性
4.中和抗体效价测定:96孔板半数保护效价(PT50)≥1:64为有效免疫应答
5.病毒粒子电镜观察:负染样本中正二十面体颗粒直径120-200nm
检测范围
1.水生动物组织样本:对虾肝胰腺、鱼类脾肾组织、蛙类皮肤黏膜
2.养殖水体及底泥:过滤浓缩后检测限达10^3TCID50/L
3.疫苗产品质控:灭活疫苗病毒残留量≤10^2copies/mL
4.饲料添加剂:动物源性成分携带病毒筛查
5.进出口检疫样本:符合OIE《水生动物卫生法典》第10.4章要求
检测方法
1.实时荧光定量PCR:参照ISO22118:2011《分子生物分析用核酸扩增方法验证规范》
2.细胞培养分离法:按GB/T36193-2018《水生动物病毒分离鉴定规程》执行
3.免疫组化检测:依据GB/T34756-2017《水生动物疫病诊断规程》制备石蜡切片
4.透射电镜观察:ASTME3060-16《生物样品透射电镜制备标准指南》
5.酶联免疫吸附试验:采用GB/T35906-2018《水生动物疫病ELISA检测方法》
检测设备
1.实时荧光定量PCR仪:ThermoFisherQuantStudio5(温度精度0.1℃)
2.超速离心机:BeckmanCoulterOptimaXPN-100(最大转速100,000rpm)
3.全自动酶标仪:BioTekSynergyH1(波长范围200-999nm)
4.核酸提取工作站:RocheMagNAPureLC2.0(通量32样本/批次)
5.透射电子显微镜:JEOLJEM-1400Flash(分辨率0.38nm)
6.梯度PCR仪:EppendorfMastercyclerX50s(温控速率6℃/s)
7.生物安全柜:ESCOAirstreamACB-4E0(H14级HEPA过滤)
8.冷冻切片机:LeicaCM1950(切片厚度1-50μm可调)
9.蛋白电泳系统:Bio-RadMini-PROTEANTetraCell(电压范围10-300V)
10.超低温冰箱:HaierDW-86L338J(-86℃2℃恒温)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。