检测项目

细胞活力检测：

• 细胞存活率测定：存活细胞百分比（≥95%，参照ISO10993-5）、台盼蓝排斥试验（阴性细胞计数）
• 凋亡检测：早期凋亡率（AnnexinV+比例）、晚期凋亡率（PI+比例）

增殖动力学检测：

• 倍增时间计算：细胞群体倍增时间（小时，参照ASTME2524）、生长曲线斜率
• 增殖率测定：CCK-8吸光度值（OD450nm）、EdU标记指数（≥80%）

细胞周期分析：

• DNA含量检测：G0/G1期比例（50-60%）、S期比例（20-30%）、G2/M期比例（10-20%）
• 增殖指数计算：PI值（S+G2/M期总和）

克隆形成能力检测：

• 克隆形成率：集落数≥50细胞（百分比）、平板效率（≥70%）
• 克隆大小分布：平均直径（μm）、变异系数

细胞迁移assay：

• 划痕愈合率：迁移距离比例（24小时≥50%）、愈合时间
• Transwell迁移细胞数：穿孔膜细胞计数（参照GB/T16886.5）

细胞侵袭assay：

• Matrigel侵袭率：穿透基质细胞数、侵袭指数
• 蛋白酶活性检测：MMP-2分泌量（ng/mL）、MMP-9活性

代谢活性检测：

• MTT还原能力：甲瓒产物吸光度（OD570nm）、线性范围
• ATP含量测定：荧光强度（RLU，参照ISO10993-5）

基因表达分析：

• 增殖相关基因：PCNAmRNA水平（相对表达量）、Ki-67表达
• 细胞周期基因：CyclinD1定量、CDK4活性

蛋白表达分析：

• WesternBlot检测：增殖标志蛋白条带密度（灰度值）、磷酸化水平
• 免疫荧光染色：阳性细胞百分比、荧光强度

信号通路检测：

• 磷酸化蛋白测定：p-ERK/ERK比率、p-AKT水平
• 通路抑制剂效应：IC50值（μM）、抑制率

检测范围

1.鹿茸尖端组织细胞：来源于鹿茸生长锥区域，重点检测高增殖活性细胞及干细胞标志物表达。

2.鹿茸中部软骨组织细胞：涉及软骨细胞分化阶段，检测增殖与分化平衡及ECM分泌能力。

3.鹿茸基部骨组织细胞：成骨细胞来源，侧重检测矿化相关增殖效应及碱性磷酸酶活性。

4.幼鹿鹿茸细胞：年龄≤1岁鹿茸，重点评估快速增殖特性及生长因子响应。

5.成鹿鹿茸细胞：年龄≥3岁鹿茸，检测增殖衰减趋势及衰老相关标志物。

6.原代鹿茸细胞培养物：直接分离自组织，检测传代稳定性及原代增殖率。

7.鹿茸细胞系：永生化细胞模型，重点检测长期增殖能力及遗传稳定性。

8.鹿茸提取物处理细胞：经鹿茸多肽或激素处理，评估外源因子对增殖的调控效应。

9.低温保存鹿茸细胞：液氮冻存后复苏细胞，检测复苏后活力恢复及增殖潜能。

10.基因编辑鹿茸细胞：CRISPR/Cas9修饰细胞，重点检测突变后增殖表型及通路变化。

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-细胞毒性测试（采用MTT法）
• ASTME2524-08(2019)细胞增殖试验标准指南（适用于EdUassay）
• ISO13022:2012医疗产品细胞迁移检测方法（Transwell模型）

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价-细胞毒性试验（CCK-8法替代MTT）
• GB/T37866-2019细胞凋亡检测方法（流式细胞术AnnexinV/PI）
• GB/T39139.1-2020细胞克隆形成试验标准（平板效率计算）

方法差异说明：ISO10993-5优先使用MTT法，而GB/T16886.5推荐CCK-8法duetohighersensitivity；ASTME2524强调线性范围验证，而国家标准更注重试剂兼容性。

检测设备

1.倒置显微镜：OlympusIX73型（放大倍数40-1000x，相位对比功能）

2.流式细胞仪：BDFACSCalibur型（检测通道4色，流速≤60μL/min）

3.酶标仪：ThermoMultiskanFC型（波长范围340-850nm，精度±1%）

4.细胞培养箱：ThermoForma311型（温度控制37±0.5°C，CO2浓度5%）

5.超净工作台：EscoAC2-4S1型（空气流速0.3m/s，HEPA过滤器）

6.离心机：Eppendorf5804R型（转速100-15000rpm，温度控制4°C）

7.实时荧光PCR仪：AppliedBiosystems7500型（检测通道5色，升温速率5°C/s）

8.蛋白电泳系统：Bio-RadMini-PROTEAN型（电压范围50-500V，凝胶尺寸8x10cm）

9.化学发光成像仪：AzureBiosystemsC600型（分辨率4MP，检测限0.1pg）

10.细胞计数仪：CountessIIFL型（荧光通道2个，精度±5%）

11.划痕assay设备：IbidiCulture-Insert型（划痕宽度500μm，兼容6孔板）

12.Transwellchamber：Corning3422型（孔径8μm，膜直径6.5mm）

13.低温储存罐：ThermoMr.Frosty型（降温速率-1°C/min，容量50mL）

14.显微操作仪：NarishigeMN-151型（移动精度1μm，三维控制）

15.振动切片机：LeicaVT1200S型（切片厚度10-100μm，频率80Hz）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。