细胞信号通路分析
因您的需求、实验方案、检测样品、测试过程不同,相应的参考标准请咨询在线工程师!
文章概述:细胞信号通路分析是研究细胞内信号转导机制的核心技术,涉及多种分子事件的精确检测。本文系统阐述关键检测项目、应用范围、相关标准及专用设备,为专业检测实践提供全面参考。
检测项目
1.蛋白质磷酸化水平检测:丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸化位点定量,激酶底物特异性分析,磷酸化动力学参数测定,磷酸化蛋白富集与鉴定,磷酸化状态与功能关联评估。
2.激酶活性测定:酶促反应速率测量,底物磷酸化效率,抑制剂半数抑制浓度计算,ATP消耗监测,活性调节因子影响分析。
3.第二信使浓度测量:环腺苷酸、环鸟苷酸、肌醇三磷酸、二酰甘油等分子定量,钙离子流动态监测,第二信使合成与降解途径评估。
4.基因表达谱分析:信号通路相关基因转录水平检测,mRNA表达量定量,差异表达基因筛选,表达时序变化追踪,调控网络构建。
5.细胞增殖与凋亡检测:细胞周期分布分析,凋亡小体形态观察, Caspase 酶活性测定,DNA 片段化检测,增殖与凋亡平衡关系研究。
6.信号转导通路激活状态评估:通路关键蛋白表达量,磷酸化修饰程度,核转位现象观察,下游效应分子活性,通路交叉对话分析。
7.受体结合实验:配体与受体亲和力测定,结合位点数量计算,解离常数推导,内化过程追踪,受体二聚化状态鉴定。
8.免疫印迹分析:目标蛋白分子量确定,表达量半定量,磷酸化特异性抗体使用,多条带现象解析,蛋白修饰形式鉴别。
9.酶联免疫吸附试验:细胞因子、趋化因子浓度测量,分泌型信号分子检测,高通量样本分析,标准曲线绘制,检测灵敏度评估。
10.荧光共振能量转移检测:分子间相互作用距离测量,蛋白质构象变化监测,活细胞内实时动态观察,供体与受体荧光团选择,能量转移效率计算。
11.细胞表面标记物检测:受体表达密度测定,内源性配体结合能力,表面蛋白糖基化状态,膜流动性影响分析,标记物共定位研究。
12.信号通路抑制剂筛选:化合物半数最大效应浓度测定,选择性指数计算,脱靶效应评估,细胞毒性测试,作用机制验证。
13.转录因子活性测定:核提取物制备,DNA 结合能力分析,报告基因表达水平,共激活因子相互作用,表观遗传调控关联。
14.代谢物谱分析:信号通路相关小分子代谢物定量,代谢流方向追踪,能量状态评估,代谢酶活性关联,代谢重编程现象研究。
15.蛋白质相互作用网络构建:酵母双杂交筛选,免疫共沉淀验证,相互作用强度量化,网络拓扑结构分析,功能模块识别。
检测范围
1.癌症细胞信号通路分析:常见于乳腺癌、肺癌、结直肠癌等实体瘤研究;表皮生长因子受体、磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶 B、Wnt 等通路异常激活检测;肿瘤增殖、侵袭、转移机制探讨;靶向药物疗效预测与耐药性评估;临床前模型验证与生物标志物发现。
2.免疫细胞信号转导:T 细胞受体、B 细胞受体、 Toll 样受体等通路研究;细胞因子信号转导抑制因子通路分析;免疫应答调控机制;自身免疫性疾病、过敏反应病理研究;免疫检查点抑制剂作用机制探索。
3.神经系统信号通路:神经元突触可塑性相关通路如 N-甲基-D-天冬氨酸受体、脑源性神经营养因子等;神经退行性疾病如阿尔茨海默病、帕金森病模型;神经递质释放与受体激活;胶质细胞相互作用;学习记忆分子基础研究。
4.干细胞分化相关信号:胚胎干细胞、诱导多能干细胞自我更新与分化调控;Notch、Hedgehog、转化生长因子 β 等通路作用;组织工程与再生医学应用;谱系特异性标记物表达监测;重编程效率优化。
5.药物靶点验证:小分子化合物、生物制剂对特定通路影响评估;剂量依赖性效应分析;脱靶风险筛查;临床前安全性评价;联合用药协同或拮抗效应研究。
6.疾病模型研究:转基因动物、类器官、细胞系等模型构建;遗传性疾病的信号通路缺陷模拟;药物筛选平台建立;病理生理机制阐释;转化医学研究桥梁。
7.转基因动物组织:过表达或敲除模型特定器官取样;发育阶段特异性通路变化;组织病理学关联分析;基因型与表型关联验证;人类疾病模拟准确性评估。
8.临床样本分析:患者血液、组织活检、体液等样本处理;循环肿瘤DNA 中信号通路突变检测;预后判断与治疗指导;生物样本库资源利用;伦理合规性确保。
9.细胞培养模型:原代细胞、细胞系、三维培养系统使用;微环境因素如缺氧、营养缺乏影响;细胞间通讯机制;体外实验条件标准化;结果可重复性控制。
10.微生物信号通路:细菌群体感应系统、毒力因子调控通路;宿主-病原体相互作用研究;抗生素耐药机制探讨;疫苗开发靶点筛选;微生物组学研究扩展。
11.内分泌系统信号:激素受体如胰岛素受体、雌激素受体通路激活;代谢性疾病如糖尿病、肥胖症模型;反馈调节机制分析;跨器官信号整合研究;生理节律影响评估。
12.心血管系统信号转导:血管内皮生长因子、一氧化氮等通路在血管生成、血压调节中作用;心肌肥厚、心力衰竭病理机制;药物心血管安全性测试;干细胞治疗相关通路监测。
13.发育生物学通路:胚胎发育过程中形态发生素梯度形成;细胞命运决定信号;组织器官形成机制;先天性畸形病因研究;进化保守性分析。
14.环境毒理学应用:污染物如重金属、有机毒物对细胞信号通路影响;应激反应通路如 p53、核因子 κB 激活;生态风险评估;安全性阈值确定;污染修复策略开发。
15.植物信号转导研究:植物激素如生长素、细胞分裂素通路;逆境响应如干旱、盐胁迫信号;病原体防御机制;转基因作物安全性评价;农业生物技术改进。
检测标准
国际标准:
ISO 15189:2012、ISO 17025:2017、ISO 10993-1:2018、ISO 13485:2016、ISO 22174:2005、ISO 20395:2019、ISO 19001:2015、ISO 27025:2017、ISO 37864:2019、ISO 10993-12:2021、ISO 13408-1:2018、ISO 14971:2019、ISO 11137-1:2006、ISO 11138-1:2017、ISO 1JianCe0-1:2014、ISO 17664:2017
国家标准:
GB/T 16886.1-2011、GB/T 19001-2016、GB/T 27025-2019、GB/T 37864-2019、GB/T 20395-2006、GB/T 14926.1-2001、GB/T 16886.5-2017、GB/T 16886.6-2022、GB/T 16886.10-2017、GB/T 16886.11-2021、GB/T 16886.12-2017、GB/T 16886.13-2022、GB/T 16886.14-2020、GB/T 16886.15-2019、GB/T 16886.16-2017、GB/T 16886.17-2022
检测设备
1.流式细胞仪:细胞表面与细胞内蛋白表达定量,细胞周期与凋亡分析,多参数同时检测,稀有细胞群分选,荧光强度与细胞大小关联评估。
2.蛋白质印迹系统:目标蛋白分离与检测,分子量标准比对,半定量分析,磷酸化特异性验证,膜再生与重复探测。
3.酶标仪:吸光度、荧光、化学发光信号读取,高通量样本分析,动力学反应监测,标准曲线自动拟合,数据输出与存储。
4.实时荧光定量聚合酶链反应仪:基因表达水平绝对或相对定量,扩增效率计算,熔解曲线分析,多重检测通道使用,实时数据跟踪。
5.激光共聚焦显微镜:亚细胞结构高分辨率成像,三维重建,荧光共定位分析,光漂白后荧光恢复实验,活细胞长时间观察。
6.质谱仪:蛋白质组学分析,磷酸化位点鉴定,代谢物定性定量,分子量精确测定,复杂样本中低丰度分子检测。
7.细胞培养箱:恒定温度、湿度、二氧化碳浓度维持,无菌环境保证,细胞生长状态监测,培养条件优化,污染防控措施实施。
8.高速离心机:细胞裂解物、亚细胞组分分离,沉淀与上清收集,梯度离心应用,转速与时间参数设定,样品完整性保护。
9.分光光度计:核酸、蛋白浓度测量,吸光度标准曲线绘制,样品纯度评估,微量样本检测,快速结果输出。
10.凝胶成像系统:电泳凝胶图像捕获,条带密度定量,分子量分析,图像增强处理,数据存档与管理。
11.微量注射系统:细胞内分子导入,基因沉默或过表达,局部信号扰动,显微操作精度控制,注射体积校准。
12.原子力显微镜:细胞表面形貌高分辨率扫描,分子间力测量,纳米级结构观察,活细胞动态监测,表面受体分布映射。
13.等温滴定量热仪:分子结合热力学参数测定,结合常数计算,熵变与焓变分析,相互作用特异性验证,样品消耗最小化。
14.生物分子相互作用分析系统:实时无标记结合动力学监测,结合速率与解离速率常数推导,亲和力比较,高通量筛选应用,数据实时可视化。
15.超高效液相色谱仪:代谢物、小分子分离与定量,高灵敏度检测,复杂混合物分析,方法开发与验证,分离效率优化。
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。