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文章概述：激肽释放酶（Kallikrein）是一类丝氨酸蛋白酶家族成员，广泛参与炎症反应、血压调节及组织修复等生理过程。其检测涉及酶活性定量、底物特异性分析及抑制剂筛选等关键指标，需采用标准化方法确保数据准确性。本文重点阐述激肽释放酶的检测项目、适用样本类型、国际/国家标准方法及核心设备配置。
检测项目
1. 酶活性测定：定量分析激肽释放酶催化能力（单位：U/mL或μmol/min/mg）
2. 蛋白浓度检测：通过BCA法或Lowry法测定总蛋白含量（灵敏度：0.1-1.2mg/mL）
3. 底物特异性分析：测定对H-D-Val-Leu-Arg-pNA等合成底物的Km值（范围：0.05-5mM）
4. 抑制剂筛选试验：测定IC50值评估抑制效率（分辨率：±0.1μM）
5. 热稳定性测试：通过差示扫描量热法测定Tm值（精度：±0.5℃）
检测范围
1. 人/动物血浆及血清样本
2. 重组激肽释放酶注射液（pH6.8-7.4）
3. 细胞培养上清液（CHO/K562/HEK293等表达体系）
4. 生物制药中间体（纯度≥90%）
5. 诊断试剂盒原料（冻干粉/液体制剂）
检测方法
ISO 15193:2009《体外诊断医疗器械-生物源性样品中量的测量-参考测量程序的表述》
GB/T 34801-2017《生化试剂中蛋白酶活力检测方法》
ASTM E2935-17《Standard Guide for Enzyme Activity Assays》
EP 2.5.15《European Pharmacopoeia - Assay of Kallikrein》
JP XVII General Tests 34《Japanese Pharmacopoeia Enzyme Activity Determination》
检测设备
Thermo Scientific NanoDrop One Microvolume UV-Vis分光光度计（波长范围：190-850nm）
Agilent 1260 Infinity II HPLC系统（色谱柱：ZORBAX SB-C18 4.6×150mm）
Malvern Zetasizer Pro动态光散射仪（粒径测量范围：0.3nm-10μm）
PerkinElmer EnSpire多功能酶标仪（检测模式：荧光/化学发光/吸收光）
Sartorius Cubis II MSA225S-1CE-DM微量天平（量程：0.001mg-220g）
Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪（温控精度±0.1℃）
Beckman Coulter Optima XPN-100超速离心机（最大转速100,000rpm）
GE Healthcare ÄKTA pure 25蛋白纯化系统（流速范围：0.001-25mL/min）
Mettler Toledo SevenExcellence pH计（分辨率0.001pH）
Siemens BCS XP System全自动凝血分析仪（凝固法/发色底物法）
北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】
报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期：7~15工作日，可加急。
资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试：支持定制化试验方案。
售后：报告终身可查，工程师1v1服务。
