有益菌落总数平板计数实验
检测项目
样品预处理:
- 均质处理:均质转速12000rpm±5%(参照ISO6887-1)
- 稀释液验证:缓冲蛋白胨水pH7.2±0.2,渗透压300±15mOsm/kg
- 稀释度梯度:10⁻¹至10⁻⁶(连续稀释误差≤5%)
- 移液精度:移液器校准误差≤1μL(ISO8655-2)
- 选择性琼脂:MRS琼脂灭菌后pH6.2±0.2(适用乳杆菌)
- 培养基性能:目标菌回收率≥70%(参照ISO11133)
- 涂布体积:0.1mL±0.02mL(GB4789.2附录B)
- 倾注温度:琼脂冷却至46℃±1℃
- 温度稳定性:36±0.5℃(ANSI/NSF49认证)
- 气体环境:厌氧罐氧浓度≤0.1%(ISO15213)
- 计数阈值:30-300CFU/平板(FDABAMChap.3)
- 形态确认:革兰氏染色阳性率≥95%(ISO19344)
- 结果修约:<100CFU保留整数,≥100CFU两位有效数字
- 不确定度:扩展不确定度≤0.35log₁₀CFU(EURACHEL指南)
- 抑制剂中和:胆盐浓度0.15%±0.02%(针对肠道样品)
- 竞争菌抑制:叠氮化钠添加量0.03g/L(ISO15214)
- 阳性对照:植物乳杆菌ATCC8014回收率80-120%
- 阴性对照:无菌平板零生长(ISO7218)
- 培养箱验证:温度均匀性±0.3℃(NIST可溯源)
- 天平精度:±0.001g(量程0-220g)
检测范围
1.发酵乳制品:酸奶、酸奶油等,重点检测保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌比例
2.益生菌制剂:冻干菌粉/胶囊,侧重活菌稳定性及包埋率验证
3.婴幼儿配方食品:添加双歧杆菌产品,需检测阪崎肠杆菌干扰
4.发酵植物基产品:豆乳发酵制品,检测植物乳杆菌特异性生长
5.保健食品:片剂/口服液,关注肠球菌属选择性计数
6.发酵肉制品:萨拉米香肠等,检测清酒乳杆菌耐盐性
7.饲料添加剂:枯草芽孢杆菌制剂,验证孢子萌发率
8.化妆品原料:发酵产物滤液,需排除杂菌污染
9.药品原料:益生菌原菌种,符合USP<2022>无菌要求
10.环境样本:发酵车间拭子,监控设备表面菌群定植
检测方法
国际标准:
- ISO19344:2015发酵乳制品中乳酸菌计数(IDF220)
- ISO15214:1998食品微生物学-厌氧菌平板计数法
- FDABAMChapter3:酸奶中乳酸菌检测
- GB4789.35-2022食品微生物学检验乳酸菌检验
- GB/T4789.34-2023双歧杆菌检验
- SN/T5364.8-2021出口益生菌产品检测规程
检测设备
1.无菌均质器:BagMixer400型(拍击速度8次/秒,均质袋爆破强度≥50N)
2.程控稀释仪:Dilumate8400(梯度稀释误差≤1%,交叉污染率<0.1%)
3.自动涂布机:EddyJet2(涂布半径误差≤0.5mm,速度可调5-60rpm)
4.厌氧培养系统:WhitleyA35(氧浓度监测精度0.01%,CO₂调控范围5-15%)
5.恒温培养箱:MemmertIPP260(温度波动±0.2℃,独立三区校准)
6.菌落计数器:Scan500(分辨率4μm,误判率<0.5%)
7.微生物鉴定仪:VITEKMS(质谱检测范围200-2000Da)
8.PCR仪:QuantStudio7(控温速率6℃/秒,孔间温差±0.2℃)
9.生物安全柜:EscoAirstream4(下降风速0.33±0.015m/s,HEPA过滤效率99.999%)
10.移液器校准仪:SartoriusCubisMCA(测量范围1μL‑10mL,精度±0.1%)
11.pH计:MettlerToledoSevenExcellence(分辨率0.001pH,自动温度补偿)
12.超纯水系统:Milli-QIQ7003(电阻率18.2MΩ·cm,TOC≤1ppb)
13.培养基分装器:Sterilmixer300(分装精度±1mL/min,温度保持46±0.5℃)
14.菌落成像系统:ProtoCOL3(RGB三色LED光源,600dpi分辨率)
15.厌氧指示剂:AnaeroGen2.5L(氧吸收率>99.9%,有效期24个月)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。