菌株原始种子裂解性测试
检测项目
细胞完整性检测:
- 细胞裂解率:裂解效率≥95%(参照ISO21527-1:2008)
- 膜完整性:荧光染色阳性率≤5%(如PI染色法)
- 形态观察:细胞碎片尺寸分布(1-10μm)
- DNA浓度:含量范围20-100ng/μL(OD260/280比值1.8-2.0)
- RNA完整性:RIN值≥7(参照ISO20391-2:2019)
- 核酸纯度:蛋白残留≤0.1μg/μgDNA
- 总蛋白含量:BCA法检测≥1mg/mL
- 酶活性:裂解酶活性单位≥500U/mg
- 杂质蛋白:SDS-PAGE纯度≥90%
- 活菌计数:CFU/mL≤10^3(参照ISO21528-1:2017)
- 死菌比例:流式细胞术检测≤10%
- 内毒素水平:≤0.25EU/mL(LAL法)
- 重金属残留:铅含量≤0.1ppm(ICP-MS法)
- 冻融循环:裂解率变化≤5%(-80℃至25℃)
- 存储稳定性:DNA降解率≤10%/年
- 基因表达:qPCRCt值≤30
- 细胞毒性:存活率≥90%(MTT法)
- 粘度:裂解液粘度≤5cP
- pH值:范围7.0-8.0
- 有机溶剂:乙醇残留≤0.5%
- 缓冲盐浓度:误差±5mM
- 序列一致性:SNP变异率≤0.01%
- 质粒拷贝数:10-50copies/cell
检测范围
1.细菌菌株:包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等,重点检测裂解效率及核酸提取纯度。
2.真菌菌株:如酵母菌、曲霉菌,侧重细胞壁裂解难度和酶活性评估。
3.病毒载体种子:涉及腺病毒、慢病毒,核心测试核酸释放完整性和生物安全性。
4.基因工程菌:重组表达菌株,强调质粒稳定性和蛋白表达水平。
5.环境微生物样本:土壤或水体来源,重点分析污染物干扰及裂解优化。
6.哺乳细胞种子:如CHO细胞,检测膜脆性和内毒素控制。
7.古菌菌株:极端环境微生物,评估高温裂解耐受性。
8.临床分离株:病原菌样本,侧重生物危害防护和快速裂解方法。
9.发酵培养物:工业发酵种子,核心测试规模裂解一致性和残留物。
10.转基因植物种子:涉及作物菌株,重点检测细胞壁多糖干扰和核酸产量。
检测方法
国际标准:
- ISO21527-1:2008微生物裂解效率测定方法
- ISO20391-2:2019核酸完整性评估规程
- ASTME2694-16细胞膜完整性测试标准
- GB/T4789.2-2016食品微生物检验通则
- GB/T34796-2017核酸提取与纯化方法
- GB/T5750.12-2006水质微生物检测规范
检测设备
1.超声波裂解仪:SONICSVCX750型(频率20kHz,功率750W)
2.分光光度计:NANODROPONE-C型(波长范围190-850nm,精度±0.1A)
3.离心机:EPPENDORF5430R型(转速30,000rpm,温度控制-10℃至40℃)
4.PCR仪:BIO-RADCFX96型(温控精度±0.1℃,通道数96)
5.流式细胞仪:BDFACSVERSE型(激光波长488nm,检测限10^3cells)
6.电泳系统:TAEPOWERPAC300型(电压范围50-300V,凝胶尺寸10x10cm)
7.酶标仪:THERMOMJianCeTISKANGO型(波长范围340-850nm,孔板数96)
8.超低温冰箱:THERMOSCIENTIFICJianCeT2586型(温度范围-86℃,容量258L)
9.生物安全柜:ESCOAC2-4S1型(气流速度0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)
10.质谱仪:AGILENT6495C型(质量精度1ppm,检测限0.1pg)
11.粘度计:BROOKFIELDDV2T型(转速范围0.1-200rpm,精度±1%)
12.pH计:METTLERTOLEDOFE28型(测量范围0-14,精度±0.01)
13.恒温摇床:NEWBRUNSWICKINNOVA42型(温度范围4℃至80℃,转速50-400rpm)
14.显微镜:OLYMPUSCX43型(放大倍数40-1000x,分辨率0.2μm)
15.冷冻干燥机:LABCONCOFREEZONE4.5型(真空度≤0.1mbar,容量4.5L)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。