检测项目

存活率评估：

• 初始细胞浓度：CFU计数（≥1×10^9CFU/mL，参照ISO7218）
• 半衰期速率：衰减常数k值（k≤0.05day^{-1}）
• 复苏率验证：恢复百分比（≥90%存活率）

稳定性测试：

• 遗传一致性：基因序列变异率（±5%偏差阈值）
• 存储衰减：温度梯度衰减（-80°C至25°C稳定性）
• 形态学维持：细胞形态异常率（≤1%变形）

污染控制：

• 微生物污染：杂菌检出限（≤10CFU/g，参照GB4789.2）
• 化学残留：保护剂残留量（甘油≤0.1mg/g）
• 生物毒素检测：内毒素水平（≤0.25EU/mL）

代谢活性：

• ATP含量：相对发光值（≥80%初始值）
• 酶活性保持：关键酶活力（如脱氢酶≥70%）
• 呼吸速率：耗氧量（≥50%基线）

环境耐受：

• pH适应性：存活率偏移（pH6-8范围内≥95%）
• 渗透压测试：盐浓度耐受（NaCl0-15%梯度）
• 氧化应激：过氧化氢耐受性（≥80%存活）

遗传分析：

• 质粒稳定性：丢失率（≤1%世代）
• 突变频率：点突变检测（参照ISO10272）
• 表达一致性：蛋白表达量（±10%变异）

存储兼容性：

• 冷冻保护剂优化：甘油/DMSO浓度（10-20%有效范围）
• 解冻周期：反复冻融耐受（≤3次衰减）
• 长期保存：5年稳定性验证（存活率≥85%）

复苏验证：

• 复苏时间：恢复时长（≤24小时）
• 活力确认：活细胞比例（≥95%）
• 生长曲线：倍增时间（参照ISO11133）

纯度鉴定：

• 真菌污染：霉菌检出（≤5CFU/g）
• 细菌交叉：非目标菌株检出（阴性标准）
• 病毒筛查：噬菌体存在（无检出）

毒理评估：

• 细胞毒性：哺乳细胞存活率（≥90%）
• 致敏性：体外致敏测试（阴性结果）
• 残留物安全：溶剂残留（≤10ppm）

功能保持：

• 发酵活性：产物产量（≥95%初始）
• 抗生素耐受：最小抑菌浓度（MIC不变）
• 生物膜形成：附着能力（≥80%基线）

检测范围

1.细菌菌株原始种子：涵盖革兰氏阳性/阴性菌，重点检测冷冻存储半衰期衰减及遗传漂变控制

2.酵母菌株原始种子：涉及酿酒酵母等，侧重代谢活性保持率和复苏效率验证

3.霉菌菌株原始种子：包括曲霉属，核心检测孢子存活率及环境耐受阈值

4.放线菌菌株原始种子：针对链霉菌等，聚焦抗生素产生稳定性和污染控制

5.乳酸菌菌株原始种子：用于发酵制品，重点测试pH适应性及存活半衰期

6.益生菌菌株原始种子：涉及双歧杆菌等，检测胃酸耐受及肠道定植能力维持

7.工业酶生产菌株原始种子：如枯草芽孢杆菌，侧重酶表达一致性及存储稳定性

8.环境修复菌株原始种子：涵盖降解菌，核心检测重金属耐受及半衰期衰减

9.疫苗生产菌株原始种子：如减毒菌株，重点验证毒力回复风险及纯度

10.基因工程菌株原始种子：涉及重组菌，检测质粒丢失率及表达稳定性

检测方法

国际标准：

• ISO7218:2013微生物检测通用要求
• ISO11133:2014培养基性能测试
• ISO10272-1:2017弯曲菌检测方法
• ISO21528-2:2017肠杆菌科检测
• ISO6579-1:2017沙门氏菌检测

国家标准：

• GB4789.2-2016食品微生物菌落总数测定
• GB/T38502-2020益生菌活力检测
• GB15193.3-2014食品安全毒理学评价
• GB/T18204.4-2013公共场所微生物检测
• GB4789.15-2016霉菌和酵母计数

方法差异说明：ISO标准侧重国际通用性（如细胞计数精度±5%），GB标准引入本土化要求（如存储温度梯度更严格，-80°C验证强制）。ISO7218覆盖基础存活率，而GB4789.2细化污染检测限值（检出限0.1CFU/gvsISO的1CFU/g）。复苏测试中，ISO11133使用标准培养基，GB/T38502添加益生菌特异性缓冲液。

检测设备

1.冷冻干燥机：CHRISTALPHA2-4LDplus型（温度范围-80°C至40°C，真空度≤0.01mbar）

2.恒温培养箱：MemmertIN260型（控温精度±0.1°C，容量200L）

3.流式细胞仪：BDAccuriC6型（检测限10^3细胞/mL，荧光通道4个）

4.PCR仪器：Bio-RadCFX96型（升温速率4°C/s，通量96孔）

5.显微镜：OlympusCX43型（放大倍数1000X，分辨率0.2μm）

6.生化分析仪：ThermoMultiskanGO型（波长范围340-850nm，精度±1%）

7.离心机：Eppendorf5810R型（转速100-15000rpm，容量4×100mL）

8.生物安全柜：EscoAirstream型（气流速度0.45m/s，HEPA过滤效率99.99%）

9.冷冻储存柜：ThermoScientificForma900型（温度-86°C±2°C，容积900L）

10.光度计：HachDR3900型（测量范围0-3.0Abs，精度±0.002）

11.厌氧工作站：DonWhitleyDG250型（氧气控制<0.1%，温度范围4-50°C）

12.恒温摇床：INFORSHTMultitron型（转速30-300rpm，控温±0.2°C）

13.电泳仪：Bio-RadPowerPacBasic型（电压10-300V，电流0-400mA）

14.细胞计数器：CountessIIFL型（自动计数精度±2%，检测范围10^4-10^7/mL）

15.高压灭菌器：Tuttnauer3870EA型（温度121°C±1°C，压力0.22MPa）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。