动物内脏粉志贺氏菌筛查
检测项目
微生物学筛查:
- 总需氧菌计数:菌落形成单位(CFU/g,参照ISO4833-1:2013)
- 志贺氏菌初筛:选择性培养基生长阳性率(≥95%灵敏度)
- 增菌培养:增菌时间(18-24小时,温度37±1°C)
- 糖发酵试验:葡萄糖阳性率、乳糖阴性率(符合FDABAM标准)
- 酶活性检测:β-半乳糖苷酶活性(阳性/阴性判定)
- 血清分型:志贺氏菌A-D群凝集试验(阴性对照要求)
- 免疫学测试:ELISA法检测志贺毒素(灵敏度≥0.1ng/mL)
- PCR检测:ipaH基因扩增(Ct值≤35,参照ISO/TS13136:2012)
- 实时荧光定量PCR:定量限(LOD≤10CFU/g)
- 志贺毒素ELISA:检测限(0.05-5ng/mL范围)
- 细胞毒性试验:半数致死浓度(LC50值测定)
- 最小抑菌浓度:抗菌药物MIC值(μg/mL,CLSIM02-A13标准)
- 耐药性筛查:多重耐药谱分析
- 生产表面取样:残留菌检出率(参照ISO18593:2018)
- 空气微生物检测:沉降菌计数(CFU/m³)
- 均质化效率:均质时间(≥5分钟,转速2000rpm)
- 灭菌验证:无菌对照设置(阴性率100%)
- 阳性对照:标准菌株回收率(85-115%)
- 检测限验证:LOD确认实验(重复三次)
- 定量结果:MPN法计算(95%置信区间)
- 不确定性评估:测量不确定度(±0.5logCFU/g)
检测范围
1.牛肝粉:重点检测志贺氏菌在肝脏组织中的存活率及交叉污染风险,确保高温处理后的残留菌控制。
2.猪肾粉:侧重肾脏样本的志贺毒素积累分析,关注冷冻储存过程中的细菌复苏检测。
3.鸡心粉:针对禽类内脏的快速筛查,强化PCR分子检测以识别低浓度污染。
4.羊脾粉:监测脾脏组织的抗菌药物残留影响,进行血清学分型确认。
5.混合动物内脏粉:涵盖多源样本的复合污染评估,重点实施增菌培养和生化鉴定。
6.冷冻内脏粉:检测冷冻-解冻循环对志贺氏菌活性的影响,优化均质前处理步骤。
7.干燥内脏粉:侧重水分活度(aW≤0.85)下的细菌抑制效果验证,强化毒素ELISA检测。
8.添加剂处理样品:评估防腐剂对志贺氏菌的杀菌效率,进行抗菌敏感性测试。
9.有机认证样品:确保无化学残留干扰,重点执行环境表面监测和PCR验证。
10.进出口批次样本:符合国际检疫标准,强化总菌计数和血清凝集试验的合规性检查。
检测方法
国际标准:
- ISO21567:2004Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs-HorizontalmethodforthedetectionofShigellaspp.
- ISO/TS13136:2012Microbiologyoffoodandanimalfeed-Real-timepolymerasechainreaction(PCR)-basedmethodforthedetectionoffood-bornepathogens
- FDABAMChapter6:Shigella
- GB/T4789.5-2023食品微生物学检验志贺氏菌检验
- GB/T27405-2008实验室质量控制规范食品微生物检测
- SN/T1870-2023出口食品中志贺氏菌检测方法
方法差异说明:ISO标准强调增菌培养基配方(如脑心浸液),GB标准细化样品稀释比例(1:10)。国际PCR方法使用TaqMan探针,而GB标准优先SYBRGreen染料,影响荧光阈值设定。
检测设备
1.生化培养箱:ThermoScientificHeratherm(温度范围:4-65°C,精度±0.1°C)
2.实时荧光定量PCR仪:AppliedBiosystemsQuantStudio7Flex(检测通道:6色,升温速率4.5°C/s)
3.微生物显微镜:OlympusCX43(放大倍数:40x-1000x,分辨率0.2μm)
4.高速离心机:Eppendorf5430R(最大转速:15000rpm,容量4x100mL)
5.均质机:IKAT25Digital(转速范围:3000-25000rpm,处理量1000mL)
6.酶标仪:BioTekSynergyH1(波长范围:200-999nm,精度±1%)
7.分光光度计:ShimadzuUV-2600i(波长精度:±0.3nm,带宽1nm)
8.生物安全柜:ESCOClassIIA2(风速:0.5m/s,HEPA过滤效率99.999%)
9.自动菌落计数器:ProtoCOL3(计数范围:0-5000CFU,误差±2%)
10.恒温水浴锅:MemmertWNB14(温度稳定性:±0.1°C,容量30L)
11.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone(真空度:<100mTorr,温度-50°C)
12.样品研磨器:RetschMM400(研磨速率:30Hz,材质不锈钢)
13.灭菌器:YamatoSM510(灭菌温度:121°C,时间≥15min)
14.ELISA洗涤机:BioTekELx405(洗涤精度:CV<5%,96孔板兼容)
15.振荡培养箱:NewBrunswickInnova44(振荡速度:50-500rpm,容量4x2L)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。