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动物内脏粉志贺氏菌筛查

检测项目

微生物学筛查:

  • 总需氧菌计数:菌落形成单位(CFU/g,参照ISO4833-1:2013)
  • 志贺氏菌初筛:选择性培养基生长阳性率(≥95%灵敏度)
  • 增菌培养:增菌时间(18-24小时,温度37±1°C)
生化鉴定:
  • 糖发酵试验:葡萄糖阳性率、乳糖阴性率(符合FDABAM标准)
  • 酶活性检测:β-半乳糖苷酶活性(阳性/阴性判定)
血清学确认:
  • 血清分型:志贺氏菌A-D群凝集试验(阴性对照要求)
  • 免疫学测试:ELISA法检测志贺毒素(灵敏度≥0.1ng/mL)
分子生物学检测:
  • PCR检测:ipaH基因扩增(Ct值≤35,参照ISO/TS13136:2012)
  • 实时荧光定量PCR:定量限(LOD≤10CFU/g)
毒素分析:
  • 志贺毒素ELISA:检测限(0.05-5ng/mL范围)
  • 细胞毒性试验:半数致死浓度(LC50值测定)
抗菌敏感性:
  • 最小抑菌浓度:抗菌药物MIC值(μg/mL,CLSIM02-A13标准)
  • 耐药性筛查:多重耐药谱分析
环境监测:
  • 生产表面取样:残留菌检出率(参照ISO18593:2018)
  • 空气微生物检测:沉降菌计数(CFU/m³)
样品前处理:
  • 均质化效率:均质时间(≥5分钟,转速2000rpm)
  • 灭菌验证:无菌对照设置(阴性率100%)
质量控制:
  • 阳性对照:标准菌株回收率(85-115%)
  • 检测限验证:LOD确认实验(重复三次)
报告参数:
  • 定量结果:MPN法计算(95%置信区间)
  • 不确定性评估:测量不确定度(±0.5logCFU/g)

检测范围

1.牛肝粉:重点检测志贺氏菌在肝脏组织中的存活率及交叉污染风险,确保高温处理后的残留菌控制。

2.猪肾粉:侧重肾脏样本的志贺毒素积累分析,关注冷冻储存过程中的细菌复苏检测。

3.鸡心粉:针对禽类内脏的快速筛查,强化PCR分子检测以识别低浓度污染。

4.羊脾粉:监测脾脏组织的抗菌药物残留影响,进行血清学分型确认。

5.混合动物内脏粉:涵盖多源样本的复合污染评估,重点实施增菌培养和生化鉴定。

6.冷冻内脏粉:检测冷冻-解冻循环对志贺氏菌活性的影响,优化均质前处理步骤。

7.干燥内脏粉:侧重水分活度(aW≤0.85)下的细菌抑制效果验证,强化毒素ELISA检测。

8.添加剂处理样品:评估防腐剂对志贺氏菌的杀菌效率,进行抗菌敏感性测试。

9.有机认证样品:确保无化学残留干扰,重点执行环境表面监测和PCR验证。

10.进出口批次样本:符合国际检疫标准,强化总菌计数和血清凝集试验的合规性检查。

检测方法

国际标准:

  • ISO21567:2004Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs-HorizontalmethodforthedetectionofShigellaspp.
  • ISO/TS13136:2012Microbiologyoffoodandanimalfeed-Real-timepolymerasechainreaction(PCR)-basedmethodforthedetectionoffood-bornepathogens
  • FDABAMChapter6:Shigella
国家标准:
  • GB/T4789.5-2023食品微生物学检验志贺氏菌检验
  • GB/T27405-2008实验室质量控制规范食品微生物检测
  • SN/T1870-2023出口食品中志贺氏菌检测方法

方法差异说明:ISO标准强调增菌培养基配方(如脑心浸液),GB标准细化样品稀释比例(1:10)。国际PCR方法使用TaqMan探针,而GB标准优先SYBRGreen染料,影响荧光阈值设定。

检测设备

1.生化培养箱:ThermoScientificHeratherm(温度范围:4-65°C,精度±0.1°C)

2.实时荧光定量PCR仪:AppliedBiosystemsQuantStudio7Flex(检测通道:6色,升温速率4.5°C/s)

3.微生物显微镜:OlympusCX43(放大倍数:40x-1000x,分辨率0.2μm)

4.高速离心机:Eppendorf5430R(最大转速:15000rpm,容量4x100mL)

5.均质机:IKAT25Digital(转速范围:3000-25000rpm,处理量1000mL)

6.酶标仪:BioTekSynergyH1(波长范围:200-999nm,精度±1%)

7.分光光度计:ShimadzuUV-2600i(波长精度:±0.3nm,带宽1nm)

8.生物安全柜:ESCOClassIIA2(风速:0.5m/s,HEPA过滤效率99.999%)

9.自动菌落计数器:ProtoCOL3(计数范围:0-5000CFU,误差±2%)

10.恒温水浴锅:MemmertWNB14(温度稳定性:±0.1°C,容量30L)

11.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone(真空度:<100mTorr,温度-50°C)

12.样品研磨器:RetschMM400(研磨速率:30Hz,材质不锈钢)

13.灭菌器:YamatoSM510(灭菌温度:121°C,时间≥15min)

14.ELISA洗涤机:BioTekELx405(洗涤精度:CV<5%,96孔板兼容)

15.振荡培养箱:NewBrunswickInnova44(振荡速度:50-500rpm,容量4x2L)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

动物内脏粉志贺氏菌筛查
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。