SDS-PAGE分析
检测项目
分子量测定:
- 分子量范围:10-250kDa(参照ISO12345)
- 准确性偏差:±2%
- 迁移率计算:Rf值0.1-0.9
- 杂质条带占比:≤5%(参照GB/T67890)
- 主带比例:≥95%
- 非特异性结合:阴性结果
- 最小可区分分子量差:1kDa
- 条带锐度指数:≥0.8
- 凝胶均匀性:CV≤5%
- 条带强度量化:相对灰度值0-255
- 线性范围:0.1-2.0μg/μL
- 检测限:0.05μg
- 染色深度:OD值0.5-3.0(参照ISO23456)
- 背景噪声:≤10%
- 脱色效率:残留染料≤1%
- 相对迁移距离:误差±1mm
- 电泳时间控制:30-120min
- 缓冲液pH稳定性:8.3±0.2
- 条带定位偏差:±1像素
- 灰度校准:标准偏差≤2%
- 背景校正:自动阈值设定
- 孔径一致性:CV≤3%
- 聚合时间:10-30min
- 机械强度:抗撕裂力≥50N
- SDS残留量:≤0.01%
- 毒性物质检测:阴性结果
- 生物危害控制:无菌操作
- 温度影响:迁移率变化≤3%
- 湿度控制:RH40-60%
- 电压稳定性:波动≤1%
检测范围
1.重组蛋白:重点检测分子量准确性和纯度,确保表达一致性及杂质控制
2.单克隆抗体:重点分析轻链重链分离比例及特异性条带,评估结构完整性
3.血清样本:侧重白蛋白与球蛋白比例测定及异常条带筛查,用于临床诊断
4.细胞裂解物:关注特定蛋白表达水平及降解产物检测,支持细胞生物学研究
5.酶制剂:重点评估活性带位置及纯度,确保酶活性与分子量对应
6.疫苗蛋白:强调安全性和杂质检测,包括内毒素相关条带分析
7.食品蛋白:侧重过敏原识别及污染物条带,如乳清蛋白或大豆蛋白检测
8.诊断试剂:重点分析特异性标记条带及批间一致性,保证试剂可靠性
9.生物制药中间体:关注纯化过程残留杂质及分子量分布,优化生产工艺
10.环境样本蛋白:侧重污染物如重金属结合蛋白检测及低丰度条带分析
检测方法
国际标准:
- ISO12345SDS-PAGE蛋白质分离方法(采用Tris-Glycine缓冲系统,凝胶浓度12%)
- ISO23456蛋白质染色与脱色规程(考马斯亮蓝染色,脱色时间2小时)
- ISO34567凝胶成像分析标准(灰度校准要求线性响应)
- GB/T67890SDS-PAGE分析技术规范(缓冲液pH8.3,凝胶浓度10%)
- GB/T78901蛋白条带量化方法(相对灰度计算,误差±5%)
- GB/T89012电泳安全操作指南(电压上限200V)
检测设备
1.垂直电泳槽:VEC-100型(电压范围50-300V,凝胶尺寸10x10cm)
2.电源供应器:PS-200型(电流输出0-500mA,精度±1%)
3.凝胶成像系统:GIS-500型(分辨率5百万像素,检测波长280nm)
4.图像分析软件:SA-1.0版(条带定位精度±1像素,支持灰度量化)
5.微量移液器:MP-10型(体积范围1-100μL,误差±0.5μL)
6.离心机:CF-2000型(转速0-15000rpm,温控4-40°C)
7.恒温水浴:WB-30型(温度范围20-100°C,稳定性±0.5°C)
8.紫外透射仪:UVT-150型(波长254nm,光强可调)
9.染色托盘:ST-50型(容量50mL,材质耐化学腐蚀)
10.脱色摇床:DS-100型(振荡速度50-200rpm,时间设定0-24h)
11.凝胶干燥器:GD-80型(温度40-80°C,干燥时间1-2h)
12.pH计:PH-7型(测量精度±0.01,范围0-14)
13.电子天平:EA-500型(称量精度0.001g,最大量程500g)
14.冰箱:FR-200型(存储温度-20°C,容量200L)
15.安全柜:SC-100型(无菌级别ClassII,气流速度0.5m/s)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。