长双歧杆菌检测-检测方法
检测项目
微生物学检测:
- 菌落计数:CFU/g(≥10^9),菌落形态(参照ISO20128)
- 纯度分析:杂菌率(≤0.1%),污染菌鉴定
- 生长曲线:倍增时间(≤2小时),稳定期持续时间
- PCR鉴定:16SrRNA序列匹配度(≥99%),特异性引物设计
- 基因测序:全基因组覆盖度(≥95x),SNP检测
- 实时定量PCR:拷贝数检测(灵敏度0.1fg/μl)
- 代谢产物:短链脂肪酸含量(乙酸≥50mg/g),乳酸产量
- 酶活性测定:β-半乳糖苷酶活性(U/mg≥10),蛋白酶活性
- 碳源利用:糖类发酵能力(阳性率≥80%)
- 杂质检测:重金属含量(Pb≤0.1ppm),残留溶剂
- 微生物污染:霉菌酵母计数(≤10CFU/g),参照GB4789.15
- 物理纯度:颗粒大小分布(D50=10-50μm)
- 活菌计数:荧光染色法(活菌率≥90%),膜完整性
- 稳定性测试:贮存存活率(25℃≥80%,6个月)
- 复苏能力:冻干复苏率(≥95%)
- 耐药性检测:MIC值(青霉素≤0.5μg/ml),参照CLSIM100
- 敏感性谱:多药耐药基因筛查
- 抑菌圈直径(≥15mm)
- 毒性测试:细胞毒性(IC50≥100μg/ml),致突变性
- 过敏原筛查:蛋白抗原性(阴性)
- 致病性评估:溶血活性(无溶血)
- 有机酸检测:丁酸含量(≥5mg/g),pH值
- 维生素合成:B族维生素产量(μg/g)
- 气体产物:氢气产生量(mL/g)
- 质粒丢失率(≤1%),基因突变频率
- CRISPR阵列分析:编辑效率
- 表达稳定性:报告基因表达量
- 温度耐受:生长范围(30-42℃),热休克蛋白表达
- pH耐受:存活pH(4.0-8.0),酸适应能力
- 渗透压耐受:盐浓度耐受(NaCl≤6%)
检测范围
1.益生菌补充剂:粉剂、胶囊制剂,重点检测活菌计数、纯度和贮存稳定性,确保每克≥10^9CFU。
2.发酵乳制品:酸奶、发酵乳,侧重菌落形态、酸度变化和杂菌污染,控制pH4.0-4.6。
3.婴儿配方奶粉:添加益生菌产品,检测基因安全性、过敏原和活菌率,确保无致病风险。
4.药品制剂:口服液、片剂,重点分析抗生素敏感性、代谢产物和毒性,符合GMP要求。
5.功能性食品:谷物棒、饮料,检测碳源利用、维生素合成和稳定性,维持功能活性。
6.环境样本:土壤、水体分离株,侧重污染菌鉴定、生长曲线和环境适应性。
7.临床样本:粪便、黏膜拭子,重点分析菌群比例、PCR鉴定和安全性,用于诊断研究。
8.研究用菌株:实验室培养物,检测基因测序覆盖度、质粒稳定性和表达一致性。
9.化妆品添加物:护肤产品,侧重纯度、致敏性和活菌存活率,确保皮肤安全性。
10.动物饲料添加剂:预混料、颗粒饲料,检测耐药性、代谢产物和环境影响,控制残留水平。
检测方法
国际标准:
- ISO20128:2006益生菌产品中活菌计数方法
- ISO15214:1998食品微生物学检验乳酸菌检测
- ISO21528-2:2017微生物学食品链中微生物计数
- AOAC986.33厌氧菌培养方法
- CLSIM07-A11需氧菌敏感性试验
- GB4789.34-2016食品微生物学检验双歧杆菌检验
- GB4789.35-2016食品微生物学检验乳酸菌检验
- GB/T38502-2020益生菌类保健食品检验
- GB5009.268-2016食品中污染物限量
- GB/T38164-2019基因测序技术规范
检测设备
1.恒温培养箱:ThermoScientificHeratherm(温度范围:室温至70℃,精度±0.1℃)
2.PCR扩增仪:Bio-RadT100(温度梯度:4-99℃,检测限0.1pg/μl)
3.倒置显微镜:OlympusCX43(放大倍数:40x-1000x,分辨率0.2μm)
4.流式细胞仪:BDFACSCalibur(检测速度:10000细胞/秒,荧光通道4个)
5.紫外分光光度计:ShimadzuUV-1800(波长范围:190-1100nm,带宽1nm)
6.高速离心机:Eppendorf5430R(最大转速:15000rpm,容量6x50ml)
7.厌氧培养系统:DonWhitleyDG250(氧气控制:<0.1%,温度范围:20-50℃)
8.自动菌落计数器:Scan1200(计数精度:99%,图像分辨率5MP)
9.DNA提取仪:QiagenQIAcube(提取效率:>95%,通量24样本)
10.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(检测限:0.01ppm,流速范围:0.001-5ml/min)
11.实时荧光定量PCR仪:AppliedBiosystems7500(动态范围:10^7,多色检测)
12.气相色谱质谱联用仪:ThermoScientificISQ(质量范围:10-2000m/z,精度1ppm)
13.电导率计:MettlerToledoSevenExcellence(测量范围:0-200mS/cm,精度±0.5%)
14.pH计:HannaInstrumentsHI5522(范围:0-14pH,精度±0.01)
15.细胞培养系统:CorningCO2培养箱(CO2控制:0-20%,湿度
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。