检测项目

细胞存活状态：

• 细胞活性测定：半数抑制浓度（IC50，参照ISO10993-5）、台盼蓝拒染率（≥95%）
• 增殖能力：EdU阳性细胞率（流式检测，误差±1.5%）
• 膜完整性：乳酸脱氢酶漏出率（LDH，≤正常组120%）

氧化应激响应：

• 活性氧水平：DCFH-DA荧光强度（激发/发射485/535nm）
• 抗氧化酶活性：超氧化物歧化酶（SOD，U/mgprot）、过氧化氢酶（CAT，μmol/min/mg）
• 脂质过氧化产物：丙二醛含量（MDA，nmol/mgprot，参照GB/T33417）

重金属代谢动态：

• 胞内蓄积量：电感耦合等离子体质谱检测限（Cd：0.01μg/L，Hg：0.05μg/L）
• 金属硫蛋白表达：WesternBlot灰度值分析（MT-1/MT-2条带积分光密度）
• 外排效率：镉离子外排速率（μmol/h/10⁶cells）

细胞器损伤：

• 线粒体功能：膜电位红绿荧光比（JC-1，红/绿≥1.2）
• 溶酶体稳定性：中性红滞留量（550nm吸光度差值）
• 内质网应激：GRP78蛋白表达量（ELISA，pg/mgprotein）

遗传毒性：

• DNA损伤：彗星试验尾矩（≤5%，参照OECD489）
• 基因突变：HPRT位点突变频率（‰，参照GB/T21794）
• 染色体畸变：微核发生率（‰，ISO21427-1）

凋亡检测：

• 早期凋亡率：AnnexinV-FITC/PI双染（流式细胞仪）
• Caspase-3活性：荧光底物Ac-DEVD-AMC水解速率（RFU/min）
• 凋亡基因表达：Bax/Bcl-2mRNA比值（qPCRCt值）

自噬效应：

• 自噬体计数：LC3-II免疫荧光斑点（≥5个/细胞）
• 自噬流检测：mRFP-GFP-LC3双荧光探针（黄/红斑点比）
• 关键蛋白：p62/SQSTM1降解量（WB条带半定量）

炎症反应：

• 炎性因子释放：IL-6、TNF-α浓度（ELISA，pg/mL）
• NF-κB核转位：免疫荧光定位分析（核质比≥2.0）
• COX-2活性：前列腺素E2生成量（RIA检测）

屏障功能：

• 上皮通透性：FITC-葡聚糖透过率（Transwell，≤对照150%）
• 紧密连接蛋白：ZO-1/occludin免疫组化评分
• 跨膜电阻值（TEER，Ω·cm²，≥300）

代谢组学：

• 三羧酸循环：柠檬酸/α-酮戊二酸比值（GC-MS分析）
• 氨基酸代谢：谷氨酰胺消耗速率（μmol/24h/10⁶cells）
• 脂质代谢：磷脂酰胆碱/鞘磷脂比（LC-MS/MS）

检测范围

1.哺乳动物上皮细胞：肝细胞（HepG2）、肾小管细胞（HK-2），重点检测重金属代谢通路及细胞器损伤

2.神经细胞模型：PC12神经元、原代星形胶质细胞，侧重氧化应激与钙离子紊乱关联性

3.造血干细胞：CD34⁺祖细胞，监测细胞分化抑制及DNA甲基化异常

4.肠道屏障细胞：Caco-2单层模型，评估紧密连接破坏及重金属跨膜转运

5.生殖细胞系：GC-1精原细胞、人绒毛膜滋养层细胞（BeWo），聚焦凋亡通路激活

6.免疫效应细胞：THP-1巨噬细胞、树突细胞，检测炎性小体激活及细胞因子风暴

7.水生生物细胞：虹鳟鱼肝细胞（RTL-W1），关注环境剂量暴露的生物累积效应

8.植物细胞培养系：烟草BY-2悬浮细胞，分析植物螯合肽（PCs）合成动力学

9.3D类器官模型：肝脏类器官、肠类器官，验证空间毒性梯度及微环境互作

10.原代细胞分离体：大鼠肝实质细胞、人外周血淋巴细胞，确保离体毒性数据生理相关性

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
• OECD487体外哺乳动物细胞微核试验
• ASTMF2149-20纳米材料细胞毒性标准试验方法
• EPA600/R-10/076鱼类细胞系毒性测试指南

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验
• GB/T35518-2017化学品体外哺乳动物细胞染色体畸变试验
• GB/T28648-2012化学品急性吸入毒性试验固定浓度法
• GB/T41704-2022纳米技术细胞凋亡检测方法指南

方法差异说明：ISO10993-5采用MTT终点法，GB/T16886.5同时认可CCK-8法；OECD487规定胞质分裂阻滞微核法（CBMN），而GB/T35518允许常规培养法；ASTMF2149要求纳米材料分散度控制，国标相应增加超声处理参数规范。

检测设备

1.电感耦合等离子体质谱仪：NexION2000型（质量范围2-290amu，分辨率0.3-3.0amu，检测限Cd0.2ng/L）

2.激光共聚焦显微镜：ZeissLSM980（光谱检测范围410-790nm，Z轴分辨率0.1μm）

3.高通量流式细胞仪：CytoFLEXSRT（检测通道13色，采样速率35,000细胞/秒）

4.全波长酶标仪：SpectraMaxi3x（波长范围200-1000nm，震荡混匀强度0-10级）

5.实时细胞分析系统：xCELLigenceRTCADP（阻抗检测频率10kHz-10MHz，96孔板同步监控）

6.超高效液相色谱仪：WatersACQUITYUPLCH-Class（压力上限18,000psi，柱温4-90℃）

7.三重四极杆质谱联用仪：SCIEXQTRAP6500+（扫描速度20,000Da/s，MRM切换时间5ms）

8.冷冻切片机：LeicaCM1950（切片厚度1-100μm，样品台温度-50℃至0℃）

9.梯度PCR仪：Bio-RadT100（温控精度±0.1℃，升降温速率4℃/秒）

10.超速离心机：OptimaXPN-100（最大转速100,000rpm，离心力802,000×g）

11.活细胞工作站：PerkinElmerOperaPhenix（共聚焦水镜NA1.1，温控±0.2℃）

12.原子吸收光谱仪：PinAAcle900T（石墨炉检测限Pb0.01μg/L，火焰法Cu0.05mg/L）

13.荧光定量PCR仪：QuantStudio6Flex（6通道检测，动态范围＞10⁹）

14.多功能微孔板检测系统：TecanSparkCyto（双激光四色荧光，AO/PI双染自动计数）

15.激光显微切割仪：LeicaLMD7（定位精度0.1μm，紫外切割脉冲长度<4ns）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。