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阿胶块动物源成分PCR检测

检测项目

DNA提取质量检测:

  • 核酸浓度:≥20ng/μL(参照ISO21571)
  • 纯度检测:A260/A280比值1.8-2.0(参照GB/T37876)
PCR扩增参数检测:
  • 扩增效率:≥90%(循环数35-40)
  • 灵敏度验证:检测限0.1pg/μL(参照ISO20395系列)
物种特异性鉴定:
  • 驴源DNA检测:引物特异性Tm值58-62°C(参照GB/T38576)
  • 非目标物种排除:牛、马DNA交叉反应阴性(参照ISO17025附录)
定量分析检测:
  • 相对定量:拷贝数变异系数≤5%(参照GB/T34796)
  • 绝对定量:标准曲线R²≥0.99(参照ISO20395)
凝胶电泳分析:
  • 条带清晰度:DNA片段大小100-300bp(参照GB/T37876)
  • 背景噪音:≤5%凝胶灰度值(参照ISO21571)
污染控制检测:
  • 抑制剂检测:内参基因Ct值≤30(参照GB/T38576)
  • 环境污染物:气溶胶DNA残留阴性(参照ISO17025)
引物探针验证:
  • 引物效率:斜率-3.3±0.1(参照GB/T34796)
  • 探针淬灭率:≥95%(参照ISO20395)
重复性测试:
  • 批内变异:CV≤10%(参照GB/T37876)
  • 批间一致性:p值≥0.05(参照ISO21571)
退火温度优化:
  • 最佳温度:58-65°C梯度验证(参照GB/T38576)
  • 二级结构影响:ΔG≤-5kcal/mol(参照ISO20395)
终点检测分析:
  • 荧光信号强度:RFU≥1000(参照GB/T34796)
  • 熔解曲线:单峰Tm值偏差±1°C(参照ISO17025)

检测范围

1.纯驴皮阿胶块:重点检测驴源DNA特异性,确保无马、牛等物种交叉污染,侧重引物验证和纯度分析。

2.混合动物源阿胶块:涵盖驴、马、牛混合样本,检测各物种DNA比例,侧重定量PCR和物种鉴定。

3.粉末状阿胶产品:针对研磨处理样本,检测DNA降解程度,侧重片段大小分析和提取效率。

4.阿胶块辅料添加物:包括糖类或草药混合体,检测抑制剂影响,侧重内参基因控制和污染排除。

5.不同产地阿胶块:如山东、河南等区域样本,检测地理标志DNA变异,侧重引物特异性和重复性测试。

6.阿胶块提取浓缩液:针对液态中间产品,检测DNA浓度稀释效应,侧重灵敏度验证和标准曲线建立。

7.假冒掺假阿胶块:含猪皮或牛皮替代品,检测非驴源DNA,侧重物种排除和交叉反应分析。

8.阿胶块加工残渣:包括皮毛残留物,检测环境污染物,侧重气溶胶控制和背景噪音评估。

9.阿胶块储存老化样品:针对长期存储样本,检测DNA降解,侧重片段大小和扩增效率。

10.阿胶块药用复方制剂:含其他中药成分,检测多重PCR干扰,侧重引物设计和退火温度优化。

检测方法

国际标准:

  • ISO21571:2005食品中核酸提取方法(使用酚-氯仿纯化)
  • ISO20395-1:2018分子检测灵敏度评估(定量PCR参数设置)
  • ISO17025:2017检测实验室通用要求(质控流程差异)
国家标准:
  • GB/T37876-2019中药DNA条形码检测(强调样本预处理步骤)
  • GB/T38576-2020动物源成分PCR鉴定(引物设计规范差异)
  • GB/T34796-2017核酸定量分析(熔解曲线分析参数)
方法差异说明:ISO标准侧重全球通用性,要求DNA提取使用标准化试剂盒;GB标准则强调中药特异性,样本预处理增加加热步骤,且引物验证参数更严格。国际标准PCR循环数固定为40轮,国家标准允许35-40轮优化。

检测设备

1.PCR扩增仪:TC-1000型(温度范围4-99°C,精度±0.1°C)

2.核酸提取仪:NE-500型(通量96样本/批次,提取效率≥95%)

3.凝胶电泳系统:GE-200型(电压范围50-150V,分辨率1bp)

4.荧光定量PCR仪:QPCR-8000型(通道数4,灵敏度0.01pg/μL)

5.微量分光光度计:MSP-300型(波长范围190-840nm,精度±0.001A)

6.离心机:CF-15000型(转速100-15000rpm,温度控制4-40°C)

7.超净工作台:CW-100型(洁净度Class100,风速0.3-0.6m/s)

8.恒温水浴锅:WB-250型(温度范围20-100°C,稳定性±0.5°C)

9.电泳成像系统:EI-600型(CCD分辨率5M像素,灰度范围0-65535)

10.振荡混合器:VM-400型(频率50-3000rpm,振幅3-10mm)

11.冷冻离心机:FCF-200型(温度-20至40°C,容量24×1.5mL)

12.pH计:PH-150型(测量范围0-14,精度±0.01)

13.微量加样器:MP-100型(体积范围0.1-1000μL,误差≤1%)

14.干燥箱:DO-300型(温度范围40-200°C,均匀性±2°C)

15.生物安全柜:BSC-500型(HEPA过滤效率99.99%,风速0.5m/s)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

阿胶块动物源成分PCR检测
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。