检测项目

遗传稳定性检测：

• 载体整合验证：整合位点特异性（Southernblot阳性率100%）、拷贝数变异（qPCRCV≤15%）
• 质粒稳定性：质粒丢失率（≤1%/代，传代50次）、抗生素抗性维持（MIC值偏差±10%）
• 基因突变筛查：目标基因序列一致性（≥99.9%，参照ISO21569）

• 蛋白表达水平：单位OD600表达量（mg/L，SDS-PAGE）、活性蛋白占比（≥80%，HPLC-SEC）
• 分泌效率：胞外蛋白浓度（BCA法）、信号肽切割效率（N端测序准确率100%）
• 诱导响应性：诱导倍数（≥50倍）、泄露表达量（≤0.1%总蛋白）

• 生长动力学：比生长速率μmax（≥0.35h⁻¹）、最大生物量OD600（≥120）
• 代谢耐受性：乙醇耐受浓度（≥12%v/v）、乙酸抑制阈值（≥8g/L）
• 营养利用：碳源转换效率（葡萄糖得率≥0.45g/g）、氮源利用率（铵盐消耗率≥95%）

• 目标产物：产物浓度（HPLC-MS/MS，RSD≤2%）、副产物比例（≤5%总碳）
• 毒性代谢物：乙酸积累量（≤1.5g/L）、高级醇占比（≤3%v/v）

• 氧化应激：H₂O₂半致死浓度（≥5mM，参照ISO21703）
• 渗透压耐受：NaCl耐受阈值（≥1.5M）

• 批次培养：产物得率（≥理论值85%）、发酵周期（≤72h）
• 连续培养：稳态维持能力（≥240h）、比生产率稳定性（CV≤8%）

• 克隆均一性：菌落直径变异系数（CV≤5%）、形态异常率（≤0.1%）
• 细胞完整性：出芽缺陷率（≤2%，显微计数）

• 蛋白相互作用：酵母双杂交β-gal活性（≥30U/mg）
• DNA结合力：EMSA迁移率变化（≥80%结合率）

• pH耐受范围：pH3.0-8.0生长能力（OD600≥50）
• 温度响应：37℃热休克存活率（≥90%）

• 抗生素抗性基因泄漏：接合转移频率（≤10⁻⁸/供体细胞）
• 环境生存力：非灭菌环境存活期（≤72h）

检测范围

1.酿酒酵母工程菌：涵盖BY系列、CEN.PK等实验室菌株，重点检测GAL启动子调控效率及CRISPR编辑位点稳定性

2.毕赤酵母表达系统：GS115/KM71等甲醇利用型菌株，侧重AOX1启动子诱导特性及蛋白酶分泌缺陷验证

3.汉逊酵母重组株：检测多拷贝整合菌株的基因组重排率及糖基化修饰一致性

4.乳酸克鲁维酵母：聚焦乳糖利用效率及pH耐受性提升菌株的代谢通量平衡

5.解脂耶氏酵母：油脂积累型工程菌，检测脂滴分布均一性及游离脂肪酸分泌量

6.表面展示工程菌：验证Aga2融合蛋白锚定效率（≥10⁴分子/细胞）及配体结合活性

7.基因组精简菌株：评估必需基因缺失株的补偿途径激活情况及生长缺陷修复

8.合成染色体酵母：全合成染色体菌株，检测着丝粒功能完整性及端粒长度稳定性

9.辅因子工程菌：NADPH/ATP调控菌株，验证辅因子通量变化对产物合成的影响系数

10.抗逆进化菌株：ALE技术选育菌种，检测突变热点分布及跨胁迫交叉抗性

检测方法

国际标准：

• ISO21569:2005转基因生物检测-核酸提取纯化方法
• ISO21703:2019酵母菌抗逆性评估-氧化应激测试规程
• ASTME2149-2020抗菌材料动态接触试验
• OECD471细菌回复突变试验（适用于抗性基因安全性）

• GB/T38569-2020工业微生物菌种稳定性检测
• GB/T35809-2018酿酒酵母培养及发酵特性测定
• GB/T4789.15-2016酵母菌计数方法（与ISO21528-2差异：平板培养温度30℃vs25℃）
• GB/T38580-2020微生物膜过滤检测（孔径要求0.22μmvsISO0.45μm）

检测设备

1.全自动菌落分析仪：SynbiosisProtoCOL3（分辨率5μm，计数速度400板/小时）

2.高通量发酵系统：DASGIPParallelBioreactor（16联反应器，DO控制精度±3%）

3.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（488nm/640nm双激光，分选纯度≥99%）

4.荧光酶标仪：ThermoVarioskanLUX（检测限0.1fmolβ-gal）

5.蛋白纯化系统：AKTApure25（线性流速0.01-100cm/h）

6.微量热泳动仪：NanotemperMonolithNT.115（Kd值检测范围1nM-10mM）

7.数字PCR系统：Bio-RadQX200（拷贝数检测限0.001%）

8.高内涵成像系统：PerkinElmerOperaPhenix（60倍水镜，Z轴步进0.5μm）

9.代谢通量分析仪：AgilentSeahorseXFe96（氧耗速率检测精度±5pmol/min）

10.全自动电泳仪：ProteinSimpleJess（蛋白定量CV≤3%）

11.生物反应量热仪：TAMIII（热功率检测限0.2μW）

12.拉曼光谱系统：BioToolsBioRam（光谱分辨率2cm⁻¹，活细胞检测）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。