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ABA激素信号传导通路解析

检测项目

蛋白表达检测:

  • PYR/PYL受体丰度:[相对表达量(foldchange),Westernblot灰度分析]
  • SnRK2激酶浓度:[μg/mg总蛋白,SDS-PAGE定量]
基因表达分析:
  • ABA响应基因表达:[RD29BmRNA水平(foldinduction),qPCRCt值差异≤0.5]
  • 转录因子调控:[ABF2表达量(相对定量值),参照AtGenExpress标准]
磷酸化状态检测:
  • SnRK2磷酸化位点:[Ser/Thr磷酸化率(%),Phos-tag凝胶分析]
  • PP2C去磷酸化效率:[底物脱磷酸速率(μmol/min/mg)]
结合亲和力检测:
  • 受体-配体结合:[Kd值(nM),SPR表面等离子共振]
  • 蛋白互作强度:[结合常数(Ka),ITC等温滴定量热]
酶活性测定:
  • SnRK2激酶活性:[Vmax(μmol/min/mg),放射性标记检测]
  • PP2C抑制效率:[IC50(μM),荧光底物分析]
细胞定位分析:
  • 蛋白亚细胞分布:[核质比(ratio),共聚焦显微镜成像]
  • 信号转导动态:[实时荧光追踪(s),FRET技术]
应激响应评估:
  • 干旱诱导效率:[气孔关闭率(%),表皮条分析]
  • 盐胁迫耐受性:[存活率(%),幼苗生长试验]
突变体功能验证:
  • 受体缺失效应:[表型评分(0-5级),表型筛选]
  • 激酶过表达影响:[基因表达变化倍数(fold),转基因分析]
高通量筛选:
  • 化合物库筛选:[抑制率(%),微孔板读板器]
  • 基因沉默效率:[敲低率(%),RNAi文库]
代谢物检测:
  • ABA积累量:[ng/g鲜重,HPLC-MS/MS]
  • 次级代谢产物:[相对丰度,GC-MS分析]

检测范围

1.拟南芥整株植物:重点检测干旱胁迫下PYR/PYL受体激活及SnRK2磷酸化动态

2.水稻幼苗根系:侧重盐胁迫诱导的ABA积累及PP2C抑制效率评估

3.玉米叶片组织:聚焦气孔导度变化与SnRK2激酶活性相关性

4.烟草细胞悬浮培养:检测ABA信号在细胞分裂中的转录因子调控

5.小麦种子萌发系统:评估ABA介导的萌发抑制及基因表达响应

6.番茄果实发育组织:侧重成熟过程中ABA受体表达与代谢物关联

7.大豆根瘤共生体系:检测ABA信号在固氮效率中的PP2C作用

8.棉花纤维伸长细胞:聚焦ABA对细胞伸长的影响及激酶磷酸化检测

9.杨树木质部组织:评估水分胁迫下ABA信号转导与基因诱导

10.蓝藻模型系统:检测ABA类似物信号通路保守性及互作蛋白验证

检测方法

国际标准:

  • ISO20186-1:2020分子生物学定量检测通则
  • ISO10993-5:2021生物材料体外检测方法
国家标准:
  • GB/T30999-2014植物激素检测技术规范
  • GB/T35800-2018蛋白质互作分析标准
(方法差异说明:ISO标准要求样品冻存于-80°C,而GB允许-20°C短期存储;ISO基因表达检测使用SYBRGreen,GB推荐TaqMan探针)

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪:PCR-8000型(检测范围:10^1-10^9copies/μl,温控精度±0.1°C)

2.蛋白电泳系统:Electrophoresis-200(电压范围:50-300V,凝胶尺寸10x10cm)

3.共聚焦显微镜:Confocal-500(分辨率:0.2μm,激光波长488nm/561nm)

4.表面等离子共振仪:SPR-700(检测限:1nM,流速范围1-100μL/min)

5.高效液相色谱质谱联用仪:HPLC-MS-900(质量精度:±0.01Da,流速0.1-2mL/min)

6.酶标仪:Microplate-600(波长范围:200-900nm,孔板格式96/384)

7.离心机:Centrifuge-3000(转速:100-15000rpm,容量6x50mL)

8.荧光共振能量转移系统:FRET-400(动态范围:1-100ms,灵敏度0.1FRET单元)

9.等温滴定量热仪:ITC-250(温度范围:4-80°C,精度±0.01°C)

10.气相色谱质谱仪:GC-MS-800(检测限:0.1ppb,柱温-50-450°C)

11.细胞培养箱:Incubator-150(温度控制:20-40°C±0.5°C,CO2调节0-20%)

12.超低温冰箱:Freezer-100(温度:-86°C±1°C,容量500L)

13.显微操作平台:Micromanip-350(定位精度:1μm,放大倍数40-1000x)

14.放射性检测仪:Radioassay-450(灵敏度:0.01Bq,能谱范围0-2000keV)

15.高通量筛选系统:HTS-700(通量:10^4样品/天,自动化机械臂)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

ABA激素信号传导通路解析
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。