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心肌组织抗氧化检测试验

检测项目

抗氧化酶活性检测:

  • 超氧化物歧化酶(SOD):活性单位≥15U/mg蛋白(参照ISO22155:2011)
  • 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx):活性单位≥30nmol/min/mg蛋白(参照GB/T34266-2017)
  • 过氧化氢酶(CAT):活性单位≥20μmol/min/mg蛋白
氧化应激标志物检测:
  • 丙二醛(MDA):浓度≤2.5nmol/mg蛋白(参照ISO22155:2011)
  • 活性氧(ROS):荧光强度单位≥500RFU/mg蛋白
  • 8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG):含量≤0.8ng/mgDNA
总抗氧化能力检测:
  • T-AOC值≥0.8U/mg蛋白(参照ASTME2186-02)
  • FRAP值≥1.2mmolFe²⁺/g
  • ABTS自由基清除率≥75%
谷胱甘肽系统检测:
  • 还原型谷胱甘肽(GSH):浓度≥5μmol/mg蛋白
  • 氧化型谷胱甘肽(GSSG):浓度≤0.5μmol/mg蛋白
  • 谷胱甘肽还原酶(GR)活性≥25nmol/min/mg蛋白
蛋白质氧化检测:
  • 蛋白质羰基含量≤3.5nmol/mg蛋白(参照GB/T34267-2017)
  • 硝基酪氨酸水平≤1.0μg/mg蛋白
DNA损伤检测:
  • DNA断裂指数≤10%
  • 彗星尾长≤25μm(参照ISO22155:2011)
炎症因子检测:
  • 肿瘤坏死因子-α(TNF-α):浓度≤50pg/mg蛋白
  • 白细胞介素-6(IL-6):浓度≤40pg/mg蛋白
心肌酶谱检测:
  • 肌酸激酶同工酶(CK-MB):活性≤25IU/L
  • 乳酸脱氢酶(LDH):活性≤300IU/L
细胞凋亡检测:
  • Caspase-3活性≤50pmol/min/mg蛋白
  • Bcl-2/Bax比值≥1.2
基因表达检测:
  • 核因子E2相关因子(Nrf2)mRNA相对表达≥1.5倍
  • 血红素加氧酶(HO-1)mRNA相对表达≥2.0倍

检测范围

1.大鼠心肌组织:涵盖缺血再灌注损伤模型,重点检测SOD活性下降及MDA水平升高。

2.小鼠心肌组织:用于基因敲除模型,侧重GPx活性变化及ROS积累评估。

3.人尸检心肌组织:取自死后样本,核心检测蛋白质羰基化程度及DNA损伤指标。

4.猪心肌组织:大型动物模型,聚焦炎症因子TNF-α和IL-6的量化分析。

5.心肌细胞培养物:体外培养系统,重点检测总抗氧化能力(T-AOC)及细胞凋亡标志物。

6.心肌组织切片:组织学样本,侧重脂质过氧化可视化及炎症响应评估。

7.心肌线粒体提取物:亚细胞组分,核心检测线粒体ROS生成及GR活性。

8.心肌匀浆上清液:生化检测样本,重点分析CK-MB和LDH酶谱活性。

9.灌注心脏模型:Langendorff装置制备,侧重实时监测氧化应激动态变化。

10.临床心肌活检样本:活体组织检测,聚焦8-OHdG水平及Nrf2基因表达。

检测方法

国际标准:

  • ISO22155:2011生物样品抗氧化能力测定方法
  • ASTME2186-02脂质过氧化产物检测标准方法
  • ISO10993-5:2009细胞毒性测试中氧化应激评估
  • ASTME2881-13蛋白质氧化标志物检测规程
  • ISO17025:2017检测实验室通用要求中抗氧化测试条款
国家标准:
  • GB/T34266-2017心肌组织谷胱甘肽系统检测方法
  • GB/T34267-2017蛋白质氧化损伤定量测定方法
  • GB/T5009.268-2016食品及生物样品中MDA检测
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物评价中氧化应激测试
  • GB/T27404-2008实验室质量控制规范中抗氧化分析要求
方法差异说明:ISO22155采用比色法测定T-AOC,试剂用量为100μL,而GB/T34266使用荧光法,试剂用量增至150μL;ASTME2186指定37°C孵育温度,GB/T5009.268则设定25°C;ISO10993-5要求细胞培养检测,GB/T16886.5扩展至组织匀浆检测。

检测设备

1.紫外-可见分光光度计:ShimadzuUV-2600型(波长范围190-1100nm,分辨率±0.1nm)

2.高速冷冻离心机:BeckmanCoulterAvantiJ-26XPI型(转速范围0-26000rpm,温控-20°C至40°C)

3.荧光显微镜:OlympusBX53型(放大倍数40x-1000x,激发波长365nm)

4.实时荧光定量PCR仪:AppliedBiosystemsQuantStudio5型(检测通道4个,温度精度±0.1°C)

5.酶标仪:BioTekSynergyH1型(波长范围200-999nm,检测模式双荧光)

6.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII型(流速范围0.001-10mL/min,检测限0.1ng/mL)

7.气相色谱质谱联用仪:ThermoScientificISQ7000型(质量范围10-2000m/z,分辨率0.1Da)

8.组织匀浆器:IKAT10Basic型(转速0-30000rpm,容量10mL)

9.超低温冰箱:ThermoScientificForma900系列(温度范围-86°C,容量700L)

10.pH计:MettlerToledoSevenExcellence型(精度±0.01pH,温度补偿自动)

11.精密天平:SartoriusCubisII型(称量范围0.001mg-220g,精度±0.01mg)

12.恒温水浴振荡器:MemmertWNB14型(温度范围室温-100°C,摇速30-300rpm)

13.电泳系统:Bio-RadMini-PROTEANTetra型(电压范围10-500V,槽数4个)

14.冷冻切片机:LeicaCM1950型(切片厚度1-100μm,温控-50°C至0°C)

15.细胞培养箱:ThermoScientificHeracell150i型(温度控制±0.1°C,CO2浓度5%)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

心肌组织抗氧化检测试验
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。