马铃薯种薯耐干旱生理指标检测
检测项目
水分代谢指标检测:
- 叶片相对含水量(RWC%):参照ISO10309-2012,计算方式为(鲜重-干重)/(饱和鲜重-干重)×100%
- 蒸腾速率(Tr):单位mmol·m⁻²·s⁻¹,采用便携式光合仪测定(LI-6400XT)
- 根系吸水率:单位g·h⁻¹·plant⁻¹,通过水培法连续称重计算
- 脯氨酸含量(Pro):单位μg·g⁻¹FW,采用茚三酮比色法(ISO6561-2005)
- 可溶性糖(SS):单位mg·g⁻¹FW,蒽酮硫酸法(GB/T30987-2014)
- 可溶性蛋白(SP):单位mg·g⁻¹FW,考马斯亮蓝G-250染色法
- 超氧化物歧化酶(SOD):单位U·g⁻¹FW,氮蓝四唑法(GB/T20196-2006)
- 过氧化物酶(POD):单位ΔA470·min⁻¹·g⁻¹FW,愈创木酚法
- 过氧化氢酶(CAT):单位ΔA240·min⁻¹·g⁻¹FW,紫外分光光度法(GB/T23742-2009)
- 丙二醛含量(MDA):单位μmol·g⁻¹FW,硫代巴比妥酸法(TBA)
- 电解质渗漏率(EL%):参照ISO11091-2012,计算方式为(胁迫电导率/煮沸电导率)×100%
- 净光合速率(Pn):单位μmol·CO₂·m⁻²·s⁻¹,便携式光合仪测定
- 气孔导度(Gs):单位mol·m⁻²·s⁻¹,同步记录Pn时的气孔参数
- 胞间CO₂浓度(Ci):单位μmol·mol⁻¹,光合仪内置传感器检测
- 地上部干重(SDW):单位g·plant⁻¹,105℃杀青后75℃烘干至恒重
- 地下部干重(RDW):单位g·plant⁻¹,根系洗净后同法烘干
- 块茎干物质含量(DMC%):(块茎干重/块茎鲜重)×100%
- 瞬时水分利用效率(WUEi):Pn/Tr,无单位
- 大田水分利用效率(WUEf):单位kg·m⁻³,计算方式为块茎产量/生育期耗水量
- 脱落酸(ABA):单位ng·g⁻¹FW,高效液相色谱法(HPLC)
- 生长素(IAA):单位ng·g⁻¹FW,酶联免疫吸附法(ELISA)
- 细胞分裂素(CTK):单位ng·g⁻¹FW,液相色谱-质谱联用(LC-MS)
- DRO1基因相对表达量:采用qRT-PCR,以Actin为内参基因
- RD29A基因转录水平:ΔΔCt值,参照MIQE指南
- 根长密度(RLD):单位cm·cm⁻³,根系扫描仪(WinRHIZO)分析
- 根表面积(RA):单位cm²·plant⁻¹,同步扫描数据
- 根体积(RV):单位cm³·plant⁻¹,排水法验证
检测范围
1.马铃薯种薯品种:鲜食型(荷兰15号、中薯5号)、加工型(大西洋、夏波蒂)、淀粉型(克新12号、陇薯7号),重点检测渗透调节物质(脯氨酸、可溶性糖)与抗氧化酶(SOD、POD)活性
2.不同生育期种薯:萌芽期(播前10天)、幼苗期(出苗后30天)、块茎形成期(现蕾后)、块茎膨大期(花后20天),侧重水分代谢(蒸腾速率、根系吸水率)与光合特性(Pn、Gs)
3.干旱胁迫梯度种薯:轻度干旱(土壤相对含水量55%-60%)、中度干旱(45%-50%)、重度干旱(35%-40%),重点检测水分利用效率(WUEi、WUEf)与膜脂过氧化(MDA、EL%)
4.脱毒种薯等级:原原种(G1)、原种(G2)、生产种(G3),侧重抗旱基因(DRO1、RD29A)表达与干物质积累(SDW、RDW)
5.异地引种种薯:北方春作区(黑龙江、内蒙古)、中原二作区(山东、河南)、南方冬作区(云南、贵州),重点检测适应性生理指标(ABA水平、根系形态)
6.杂交后代种薯:F1代(杂交一代)、F2代(分离世代)、回交一代(BC1),侧重抗旱基因表达与块茎干物质含量(DMC%)
7.诱变育种种薯:γ射线诱变(200Gy、300Gy)、EMS诱变(0.3%、0.5%浓度)、太空诱变(返回式卫星搭载),重点检测突变体的渗透调节能力与抗氧化系统
8.砧木种薯:抗逆砧木(抗青枯病砧木、抗根结线虫砧木)、野生种砧木(Solanumdemissum、Solanumchacoense),侧重根系形态(根长密度、根表面积)与水分吸收能力
9.贮藏期种薯:常温贮藏(20-25℃)、低温贮藏(4-6℃)、气调贮藏(O₂3%-5%、CO₂2%-4%),重点检测干物质含量(DMC%)与激素水平(IAA、CTK)
10.灾后恢复种薯:干旱灾后复水(复水后7天、14天)、干旱伴高温(35℃以上),侧重光合恢复能力(Pn回升率)与抗氧化酶活性(CAT、SOD)
检测方法
国际标准:
- ISO10309-2012植物叶片相对含水量测定方法
- ISO11091-2012植物蒸腾速率与气孔导度测定(便携式光合仪法)
- ISO6561-2005植物脯氨酸含量测定(茚三酮比色法)
- GB/T30987-2014植物可溶性糖含量测定(蒽酮硫酸法)
- GB/T23742-2009植物过氧化氢酶活性测定(紫外分光光度法)
- GB/T20196-2006植物超氧化物歧化酶活性测定(氮蓝四唑法)
- GB/T29378-2012植物根系形态参数测定(扫描仪法)
检测设备
1.便携式光合仪:LI-6400XT(测量范围:Pn-20-200μmol·CO₂·m⁻²·s⁻¹,Tr0-10mmol·m⁻²·s⁻¹,精度±0.5%)
2.紫外分光光度计:ShimadzuUV-2600(波长范围190-900nm,分辨率0.1nm,straylight<0.0005%at220nm)
3.电子天平:SartoriusCPA225D(量程0-220g,可读性0.01mg,线性误差±0.03mg)
4.高速冷冻离心机:Eppendorf5810R(最大转速14000rpm,最大相对离心力18600×g,温度范围-10-40℃)
5.酶标仪:BioTekSynergyH1(检测模式:吸光度、荧光、化学发光,波长范围200-999nm,分辨率1nm)
6.根系扫描仪:WinRHIZOPro2020(扫描面积40×30cm,分辨率400dpi,根长测量精度±0.01cm)
7.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(泵类型:四元梯度泵,流量范围0.001-10mL/min,柱温箱范围5-80℃)
8.实时荧光定量PCR仪:ABIStepOnePlus(检测通道:4色,反应体系10-100μL,灵敏度1copies/μL)
9.恒温鼓风干燥箱:BinderFD115(温度范围5-300℃,波动度±0.5℃,容积115L)
10.电导率仪:DDS-307A(测量范围0-100mS/cm,分辨率0.001mS/cm,精度±1%F.S.)
11.超声波清洗器:KQ-500DE(功率500W,频率40kHz,容量10L,温度范围20-80℃)
12.液氮罐:YDS-10(容量10L,静态液氮保存期30天,蒸发率<1.5%/天)
13.叶片饱和鲜重测定装置:自制(包括500mL烧杯、蒸馏水、滤纸、电子天平)
14.根系吸水率测定系统:HK-800(测量范围0-100g·h⁻¹,精度±0.1g,带自动记录功能)
15.超低温冰箱:ThermoFisherRevcoJianCeT-80(温度范围-86-0℃,容积580L,均匀度±1℃)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。