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心脏灌流心肌细胞代谢组学试验

检测项目

能量代谢检测:

  • ATP/ADP比率:≥2.5(参照生理基线)
  • 乳酸浓度:≤5mmol/L(缺血阈值)
  • 糖原含量偏差:±10%
脂肪酸代谢检测:
  • 游离脂肪酸总量:0.1-1.0mM(正常范围)
  • β-氧化产物:乙酰辅酶A≥0.05μM(灵敏度限)
氨基酸代谢检测:
  • 支链氨基酸浓度:亮氨酸≤50μM(病理上限)
  • 谷氨酸/谷氨酰胺比率:1.2-1.8(稳态指标)
糖代谢检测:
  • 葡萄糖利用率:≥80%效率(灌流参数)
  • 果糖-二磷酸浓度:≤0.1mM(代谢失衡阈值)
氧化应激标记物检测:
  • 活性氧水平:≤100RLU(参照对照)
  • 丙二醛浓度:≥5μM(氧化损伤阈值)
  • 谷胱甘肽总量:1.0-3.0mM(还原态占比≥70%)
炎症因子检测:
  • 白细胞介素-6浓度:≤10pg/mL(基线)
  • 肿瘤坏死因子-α:检测限0.01pg/mL
核苷酸代谢检测:
  • 环核苷酸浓度:cAMP≥1.0pmol/mg(信号阈值)
  • 嘌呤代谢物:尿酸≤0.2mM
磷脂代谢检测:
  • 磷脂酰胆碱含量:±15%变异
  • 溶血磷脂酸浓度:≥0.05μM(膜损伤标记)
神经递质相关检测:
  • 去甲肾上腺素水平:0.5-5.0nM(应激响应)
  • 乙酰胆碱酯酶活性:≥80%抑制率(药效标准)
代谢通量分析:
  • 三羧酸循环通量:≥90%效率(参照模型)
  • 糖酵解速率:偏差±5%

检测范围

1.大鼠离体心脏灌流模型:涵盖Langendorff灌流系统制备样本,重点检测缺血再灌流期间的代谢物动态变化。

2.小鼠原代心肌细胞培养:使用胶原酶消化分离细胞,侧重药物干预下的能量代谢标记物分析。

3.人心肌活检组织:取自手术切除样本,核心检测脂肪酸氧化产物及炎症因子水平。

4.缺血再灌流实验模型:模拟心肌梗死条件,重点评估氧化应激标记物和ATP恢复率。

5.药物处理心肌细胞样本:涉及心血管药物暴露,检测糖代谢通量和氨基酸浓度变化。

6.缺氧模型心肌组织:低氧环境下培养,侧重乳酸积累和活性氧生成检测。

7.衰老相关心肌病变样本:取自老年动物模型,重点分析核苷酸代谢紊乱和膜磷脂损伤。

8.糖尿病心肌样本:高糖诱导模型,核心检测胰岛素抵抗下的糖原含量异常。

9.心肌梗死动物模型:冠状动脉结扎制备,侧重炎症因子爆发及能量危机评估。

10.转基因小鼠心肌组织:基因编辑模型,检测特定代谢酶缺失时的通量失衡。

检测方法

国际标准:

  • ISO21378:2020生物样本代谢物液相色谱质谱联用分析方法(采用反相色谱分离)
  • ASTME3135-22细胞代谢组学定量检测指南(强调内标校正)
国家标准:
  • GB/T30968-2021心肌组织代谢组学检测技术规范(要求样本预处理冻存)
  • GB/T28945-2023氧化应激标记物荧光检测法(使用DCFH-DA探针)
方法差异说明:ISO标准采用高分辨率质谱,GB标准侧重常规LC-MS;ASTM指南允许动态范围扩展,GB规范严格限定样本体积误差±2%。

检测设备

1.超高效液相色谱质谱联用仪:SYNAPTXS型(分辨率30000,质量精度±1ppm)

2.高速冷冻离心机:LEGENDMICRO21R型(转速20000rpm,温度控制-20°C)

3.荧光分光光度计:FLS980型(激发波长范围200-800nm,检测限0.01nM)

4.气相色谱质谱仪:TRACE1310型(毛细管柱内径0.25mm,载气氦气纯度99.999%)

5.生物安全柜:BSC-1600IIA2型(洁净等级Class100,风速0.45m/s)

6.超低温冰箱:DW-86L626型(温度范围-86°C,容量600L)

7.细胞培养箱:HERAcell240i型(CO2控制精度±0.1%,湿度维持95%)

8.酶标仪:SPJianCeROstarNano型(波长范围230-1000nm,吸光度精度±0.005)

9.组织匀浆机:T10basic型(转速30000rpm,探头直径10mm)

10.灌流系统控制器:MPVSUltra型(流量精度±1μL/min,压力监测范围0-200mmHg)

11.氮吹浓缩仪:N-EVAP112型(温度控制40°C,气体流速调节0.5-5L/min)

12.紫外可见分光光度计:UV-2600i型(带宽1nm,扫描速度400nm/min)

13.电化学工作站:CHI660E型(电位范围±10V,电流分辨率10pA)

14.真空冷冻干燥机:FD-1A-50型(冷阱温度-55°C,真空度≤10Pa)

15.微孔板振荡器:MS3型(频率范围0-3000rpm,振幅调节0.1-5mm)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

心脏灌流心肌细胞代谢组学试验
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。