心脏灌流心肌细胞代谢组学试验
检测项目
能量代谢检测:
- ATP/ADP比率:≥2.5(参照生理基线)
- 乳酸浓度:≤5mmol/L(缺血阈值)
- 糖原含量偏差:±10%
- 游离脂肪酸总量:0.1-1.0mM(正常范围)
- β-氧化产物:乙酰辅酶A≥0.05μM(灵敏度限)
- 支链氨基酸浓度:亮氨酸≤50μM(病理上限)
- 谷氨酸/谷氨酰胺比率:1.2-1.8(稳态指标)
- 葡萄糖利用率:≥80%效率(灌流参数)
- 果糖-二磷酸浓度:≤0.1mM(代谢失衡阈值)
- 活性氧水平:≤100RLU(参照对照)
- 丙二醛浓度:≥5μM(氧化损伤阈值)
- 谷胱甘肽总量:1.0-3.0mM(还原态占比≥70%)
- 白细胞介素-6浓度:≤10pg/mL(基线)
- 肿瘤坏死因子-α:检测限0.01pg/mL
- 环核苷酸浓度:cAMP≥1.0pmol/mg(信号阈值)
- 嘌呤代谢物:尿酸≤0.2mM
- 磷脂酰胆碱含量:±15%变异
- 溶血磷脂酸浓度:≥0.05μM(膜损伤标记)
- 去甲肾上腺素水平:0.5-5.0nM(应激响应)
- 乙酰胆碱酯酶活性:≥80%抑制率(药效标准)
- 三羧酸循环通量:≥90%效率(参照模型)
- 糖酵解速率:偏差±5%
检测范围
1.大鼠离体心脏灌流模型:涵盖Langendorff灌流系统制备样本,重点检测缺血再灌流期间的代谢物动态变化。
2.小鼠原代心肌细胞培养:使用胶原酶消化分离细胞,侧重药物干预下的能量代谢标记物分析。
3.人心肌活检组织:取自手术切除样本,核心检测脂肪酸氧化产物及炎症因子水平。
4.缺血再灌流实验模型:模拟心肌梗死条件,重点评估氧化应激标记物和ATP恢复率。
5.药物处理心肌细胞样本:涉及心血管药物暴露,检测糖代谢通量和氨基酸浓度变化。
6.缺氧模型心肌组织:低氧环境下培养,侧重乳酸积累和活性氧生成检测。
7.衰老相关心肌病变样本:取自老年动物模型,重点分析核苷酸代谢紊乱和膜磷脂损伤。
8.糖尿病心肌样本:高糖诱导模型,核心检测胰岛素抵抗下的糖原含量异常。
9.心肌梗死动物模型:冠状动脉结扎制备,侧重炎症因子爆发及能量危机评估。
10.转基因小鼠心肌组织:基因编辑模型,检测特定代谢酶缺失时的通量失衡。
检测方法
国际标准:
- ISO21378:2020生物样本代谢物液相色谱质谱联用分析方法(采用反相色谱分离)
- ASTME3135-22细胞代谢组学定量检测指南(强调内标校正)
- GB/T30968-2021心肌组织代谢组学检测技术规范(要求样本预处理冻存)
- GB/T28945-2023氧化应激标记物荧光检测法(使用DCFH-DA探针)
检测设备
1.超高效液相色谱质谱联用仪:SYNAPTXS型(分辨率30000,质量精度±1ppm)
2.高速冷冻离心机:LEGENDMICRO21R型(转速20000rpm,温度控制-20°C)
3.荧光分光光度计:FLS980型(激发波长范围200-800nm,检测限0.01nM)
4.气相色谱质谱仪:TRACE1310型(毛细管柱内径0.25mm,载气氦气纯度99.999%)
5.生物安全柜:BSC-1600IIA2型(洁净等级Class100,风速0.45m/s)
6.超低温冰箱:DW-86L626型(温度范围-86°C,容量600L)
7.细胞培养箱:HERAcell240i型(CO2控制精度±0.1%,湿度维持95%)
8.酶标仪:SPJianCeROstarNano型(波长范围230-1000nm,吸光度精度±0.005)
9.组织匀浆机:T10basic型(转速30000rpm,探头直径10mm)
10.灌流系统控制器:MPVSUltra型(流量精度±1μL/min,压力监测范围0-200mmHg)
11.氮吹浓缩仪:N-EVAP112型(温度控制40°C,气体流速调节0.5-5L/min)
12.紫外可见分光光度计:UV-2600i型(带宽1nm,扫描速度400nm/min)
13.电化学工作站:CHI660E型(电位范围±10V,电流分辨率10pA)
14.真空冷冻干燥机:FD-1A-50型(冷阱温度-55°C,真空度≤10Pa)
15.微孔板振荡器:MS3型(频率范围0-3000rpm,振幅调节0.1-5mm)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。