检测项目

菌株鉴定：

• 基因序列比对：16S rRNA相似度（≥99%，参照ISO 15214）
• 表型特征分析：革兰氏染色阳性率（100%）、过氧化氢酶阴性判定
• 物种特异性PCR：靶基因扩增效率（Ct值≤30）

活菌计数：

• 平板计数法：CFU/g浓度（10^7-10^10范围，GB 4789.35）
• 流式细胞术：活力细胞比例（≥90%，参照ISO 19344）
• MPN法：置信区间（95%概率）

代谢产物分析：

• 短链脂肪酸检测：乙酸浓度（≥2.0mmol/L）、丙酸产量（HPLC法）
• 乳酸脱氢酶活性：酶活力单位（U/mg，参照AOAC 999.13）
• 挥发性有机酸谱：峰面积比值（GC-MS法）

抗生素敏感性：

• 纸片扩散法：抑菌圈直径（mm，CLSI M100标准）
• MIC测定：最低抑菌浓度（μg/mL，参照EUCAST）
• 耐药基因筛查：mecA靶点检出限（≤10 copies）

环境耐受性：

• pH稳定性测试：存活率（pH 2.0-7.0范围≥70%）
• 温度耐受性：热休克存活（50°C处理30min存活率≥50%）
• 胆盐耐受：脱氧胆酸钠浓度（0.3%存活率≥60%）

基因稳定性：

• 质粒保留率：传代稳定性（≥95%保留，PCR验证）
• 突变频率：SNP检测频次（≤10^-6）
• CRISPR阵列分析：间隔序列一致性（100%匹配）

毒性评估：

• 溶血试验：溶血环直径（≤1mm，参照GB 15193.3）
• 肠毒素检测：毒素基因阴性判定（PCR法）
• 细胞毒性测试：LD50值（≥1000mg/kg）

发酵性能：

• 产酸速率：pH下降梯度（0.1-0.3/h）
• 生物量积累：OD600值（≥1.5）
• 底物利用率：葡萄糖消耗率（≥90%）

保质期稳定性：

• 加速储存试验：活菌衰减率（25°C/60%RH下≤1 log/year）
• 水分活度影响：Aw值临界点（≤0.6存活率≥80%）
• 光照稳定性：UV照射存活率（≥70%）

功能特性：

• 粘附能力：肠上皮细胞粘附率（≥5%）
• 免疫调节：IL-10分泌量（ELISA法≥50pg/mL）
• 抗氧化活性：DPPH清除率（≥60%）

检测范围

1. 发酵乳制品： 酸奶、奶酪等，重点检测活菌浓度和代谢酸度变化

2. 益生菌补充剂： 胶囊、片剂形式，侧重菌株纯度和抗生素耐药性评估

3. 婴儿配方食品： 粉状或液态产品，需验证无毒性基因和稳定性指标

4. 动物饲料添加剂： 禽畜用益生菌制剂，检测环境耐受性和功能活性

5. 医药制剂： 肠溶胶囊或注射液，关注无菌保证和基因稳定性

6. 化妆品原料： 发酵提取物，重点分析微生物污染和代谢产物安全性

7. 环境水样： 水源或废水，侧重菌落计数和耐药基因筛查

8. 生物样本： 粪便或组织样品，需进行特异性鉴定和活菌定量

9. 食品添加剂： 防腐剂或发酵剂，验证保质期稳定性和功能特性

10. 研究培养物： 实验室菌株库，全面覆盖基因测序和表型分析

检测方法

国际标准：

• ISO 15214:1998 乳酸菌鉴定规程
• AOAC 991.14 益生菌平板计数法
• CLSI M45-A3 抗生素敏感性试验
• ISO 19344:2015 流式细胞术活菌检测

国家标准：

• GB 4789.35-2016 食品微生物学检验乳酸菌计数
• GB 15193.3-2014 食品安全性毒理学评价
• GB/T 38502-2020 微生物基因测序规范
• GB/T 38478-2020 益生菌功能活性检测

方法差异说明：国际标准如ISO强调菌株鉴定多基因比对，而国标GB 4789.35优化平板培养基配方；ISO 19344采用荧光染色法，GB/T 38478则整合ELISA免疫检测；CLSI抗生素试验基于美欧菌株库，国标GB 15193.3增加本土毒性参照。

检测设备

1. PCR仪： Bio-Rad CFX96型（温度精度±0.1°C，通量96孔）

2. 流式细胞仪： BD FACSCanto II型（检测限10^3 cells/mL，激光波长488nm）

3. 气相色谱仪： Agilent 8890型（分辨率0.1ppb，柱温范围40-400°C）

4. 高效液相色谱仪： Waters ACQUITY UPLC型（流速范围0.001-5mL/min，检测波长190-800nm）

5. 厌氧培养箱： Thermo Scientific Forma系列（氧浓度≤0.1%，温度控制±0.5°C）

6. 显微镜： Olympus BX53型（放大倍数1000X，相衬成像）

7. 离心机： Eppendorf 5810R型（转速200-15000rpm，容量4×100mL）

8. 酶标仪： Tecan Infinite M200型（吸光范围230-1000nm，精度±1%）

9. 生物安全柜： Esco Airstream系列（风速0.45m/s，HEPA过滤效率99.99%）

10. 恒温摇床： New Brunswick Innova 44型（温度范围4-80°C，振荡速度50-400rpm）

11. 紫外分光光度计： Shimadzu UV-2600型（波长范围190-1100nm，带宽1nm）

12. 电泳系统： Bio-Rad Mini-PROTEAN型（电压范围10-300V，凝胶尺寸8cm×10cm）

13. 冷冻干燥机： Labconco FreeZone型（真空度≤0.1mbar，温度-50至40°C）

14. 自动菌落计数器： Interscience Scan 500型（计数精度±1%，图像分辨率5MP）

15. 实时荧光定量PCR仪： Roche LightCycler 480型（循环时间≤45min，动态范围10^1-10^9 copies）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。