对虾杆状病毒病检测
检测项目
1.病毒核酸定性检测:采用PCR技术检测BPV特异性基因片段(如DNA聚合酶基因),扩增条件:退火温度58℃2℃,循环数35次
2.包涵体形态学分析:透射电镜观察多角体蛋白晶体结构(尺寸范围80-200nm),染色方法:磷钨酸负染法
3.抗原蛋白定量检测:ELISA法测定VP39衣壳蛋白浓度(波长450nm/630nm双波长读数)
4.抗体效价测定:间接免疫荧光法(IFA)检测血清抗体水平(稀释梯度1:20至1:1280)
5.病毒载量测定:实时荧光定量PCR(qPCR)建立标准曲线(Ct值≤35为阳性判定阈值)
检测范围
1.虾苗样本:PL10-PL15期幼体头胸部组织(取样量≥0.1g/尾)
2.成虾样本:肝胰腺组织匀浆液(处理温度4℃1℃)
3.配合饲料:鱼粉基质中病毒颗粒残留检测(粉碎粒度≤100目)
4.养殖水体:0.22μm滤膜富集环境DNA(采样体积≥500mL)
5.生物饵料:卤虫无节幼体整体样本(保存条件-80℃液氮速冻)
检测方法
ISO23040:2021《水生动物疫病环境DNA检测技术规范》第7.3章病毒富集方法
GB/T34755-2017《对虾杆状病毒PCR检测方法》规定引物序列BPV-F:5'-ATGCGTCGACAGTTCA-3'
OIE《水生动物诊断手册》第2.3.2章病理切片制备标准(H&E染色时间控制152min)
ASTMD8083-16《水产病原体核酸检测通用要求》核酸提取纯度标准(A260/A280比值1.8-2.0)
NY/T3467-2019《对虾病害诊断技术规程》规定解剖器械灭菌条件(121℃高压灭菌20min)
检测设备
1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:温度控制精度0.1℃,支持TaqMan探针法
2.HitachiHT7800透射电子显微镜:加速电压80kV,配备CCD相机(分辨率4k4k)
3.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:波长范围340-850nm,温控孵育功能
4.Eppendorf5430R高速冷冻离心机:最大转速30,000rpm,温控范围-20℃至40℃
5.LeicaCM1950冰冻切片机:切片厚度调节范围1-50μm,样品台温度-50℃至-5℃
6.MiltenyiBiotecGentleMACS组织匀浆器:程序化裂解协议(运行时间90s5s)
7.SartoriusCubisII精密天平:称量精度0.01mg,符合GLP规范
8.MemmertINCOmed培养箱:温度均匀性0.3℃,CO₂浓度控制范围0-20%
9.HamiltonMicrolabSTARlet液体工作站:移液精度CV≤1%,支持96孔板操作
10.OlympusBX53荧光显微镜:汞灯光源寿命2000h,配备DP74数字相机
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。