检测项目

灵敏度验证：

• 检测限（LOD）：≤10copies/μL（参照CLSIEP17-A2）
• 定量限（LOQ）：≥20copies/μL（参照ISO17822）
• 低浓度样本检测：检测概率≥95%

特异性验证：

• 交叉反应测试：无假阳性（参照CLSIMM17）
• 种属特异性：仅靶向支原体DNA（覆盖率≥99%）
• 非靶标干扰：细菌DNA无影响

准确性评估：

• 回收率：95%-105%（参照ISO17025）
• 偏差：≤±5%（参照GB/T27403）
• 标准曲线拟合：R^2≥0.99

重复性测试：

• 批内精密度：CV≤5%（参照CLSIEP05-A3）
• 批间精密度：CV≤10%（参照ISO17822）
• 操作员间一致性：差异≤3%

线性范围验证：

• 动态范围：10^2-10^7copies/μL（参照CLSIEP06）
• 斜率：0.95-1.05
• 截距：≤10%

稳健性评估：

• 反应条件变化：温度±2°C仍有效（参照ISO17822）
• 试剂批次差异：性能偏差≤5%
• 样本体积偏差：±10%不影响结果

检测时间优化：

• 扩增时间：≤60分钟（参照GB/T27403）
• 样本处理时效：≤30分钟
• 报告出具时间：≤24小时

样本处理验证：

• DNA提取效率：≥90%（参照CLSIMM17）
• 抑制剂耐受：血红素≤10mg/mL无影响
• 保存稳定性：-80°C下≥6个月

质量控制：

• 内标检测：内控基因扩增（如β-actinCt值≤28）
• 阴性对照：无扩增信号（参照ISO17025）
• 阳性对照：Ct值18-22

交叉污染控制：

• 操作环境监控：每批次阴性样本测试（参照GB/T27403）
• 设备清洁验证：残留DNA≤1copy/μL
• 气溶胶防护：生物安全柜达标

检测范围

1.细胞培养物：涵盖哺乳动物细胞系（如HEK293、CHO）和干细胞培养物，检测重点为污染水平监控和早期预警。

2.生物制品：包括疫苗、抗体和重组蛋白生产原料，侧重残留支原体污染检测以确保产品安全性。

3.医疗器械：涉及植入物、导管和手术器械，检测表面或内部污染以符合生物相容性要求。

4.组织工程产品：如人工皮肤或骨支架，关注细胞培养阶段的污染控制及生物安全性验证。

5.基因治疗载体：病毒载体（如AAV、LV）生产过程中，检测支原体污染以避免交叉感染。

6.发酵产物：细菌或酵母发酵液，监控发酵过程污染水平以确保产物纯度。

7.诊断试剂盒：PCR试剂盒原材料（如引物、探针），检测潜在污染源以保证试剂性能。

8.环境样本：实验室表面、空气或水样擦拭，评估洁净区污染风险。

9.食品样本：乳制品、肉类等，检测加工过程支原体污染以保障食品安全。

10.临床样本：患者体液或组织样本，检测支原体感染诊断及治疗监测。

检测方法

国际标准：

• ISO17025:2017测试和校准实验室能力通用要求（涵盖管理体系和验证流程）
• CLSIMM17分子诊断方法验证指南（详细规定PCR验证参数和阈值）
• ISO17822:2020体外诊断试剂性能评估（专注灵敏度和特异性测试方法）

国家标准：

• GB/T27403-2008实验室质量控制规范（类似ISO17025但强化操作规范）
• YY/T1258-2015支原体检测方法（针对支原体PCR检测，规定样本处理和扩增条件）
• GB/T37871-2019分子生物学检测通用要求（涵盖DNA提取和扩增标准化）

（方法差异说明：国际标准如CLSIMM17强调参数阈值细节，而国家标准YY/T1258更注重特定应用场景；ISO17822要求动态范围验证，GB/T27403则侧重实验室整体质控。）

检测设备

1.实时荧光PCR仪：AppliedBiosystems7500（检测通道：FAM,HEX,ROX,CY5）

2.DNA提取仪：QIAGENQIAcube（通量：24样本/批次，提取效率≥95%）

3.高速离心机：Eppendorf5430（转速：15000rpm，容量：24x2.0mL）

4.微量分光光度计：NanoDrop2000（波长范围：190-840nm，检测限：2ng/μL）

5.恒温混匀器：ThermoMixerC（温度范围：4-99°C，振荡频率：300-1500rpm）

6.生物安全柜：EscoAirstream（洁净度：ClassIIA2，气流速度：0.5m/s）

7.超低温冰箱：ThermoScientificJianCeT（温度：-80°C，容量：700L，稳定性±1°C）

8.微量移液器：EppendorfResearchplus（量程：0.1-1000μL，精度：±0.5%）

9.PCR扩增仪：Bio-RadT100（热盖温度：105°C，升降温速率：4°C/s）

10.凝胶电泳系统：Bio-RadPowerPac（电压范围：10-300V，运行时间：30分钟）

11.水纯化系统：Milli-QIntegral（电阻率：18.2MΩ·cm，产水速度：2L/h）

12.恒温培养箱：MemmertIN55（温度控制：±0.1°C，容量：55L）

13.磁珠纯化仪：KingFisherFlex（磁头数：96，处理时间：≤20分钟）

14.振荡培养箱：IKAKS130（频率：50-500rpm，温度范围：室温-80°C）

15.数据采集器：FlukeHydra（通道数：20，精度：±0.1%）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。