抗生素耐药性测试
检测项目
药敏试验:
- 最小抑菌浓度(MIC):数值型结果(μg/mL),判定标准参照CLSIM100-S33
- 纸片扩散法:抑菌圈直径精确至0.1mm(如头孢他啶≥21mm为敏感)
- E试验:MIC梯度测试(浓度范围0.002-32μg/mL)
- ESBLs表型确认:头孢噻肟/克拉维酸增效≥5mm(CLSIM07-A11)
- AmpC酶检测:三维试验抑菌圈变形(标准WS/T497-2017)
- 改良碳青霉烯灭活试验(mCIM):美罗培南抑菌圈≤15mm为阳性
- CarbaNP试验:比色法pH值变化(ISO20776-2:2021)
- 梯度浓度琼脂筛选:菌落生长浓度≥8μg/mL(EUCASTv13.0)
- vanA/vanB基因PCR检测:扩增产物≥100bp(引物特异性≥99%)
- MGIT960系统:利福平生长单位≥100(参照WHO/GL/TB)
- 线性探针杂交:rpoB基因突变检出限1%
- 酵母微量稀释法:氟康唑MIC≥4μg/mL(CLSIM27-A3)
- 丝状真菌E试验:折点判定间距±1梯度
- 棋盘稀释法:部分抑菌浓度指数(FIC≤0.5)
- 时间杀菌曲线:CFU降低≥2log10
- 结晶紫定量:OD570≥0.5(参照ASTME2562-17)
- 最小生物膜清除浓度(MBEC):≥8×MIC值
- 接合转移试验:接合子筛选浓度≥32μg/mL
- 质粒电泳图谱:超螺旋结构完整性≥90%
- 持久菌检测:抗生素暴露后CFU下降斜率≤0.2
- 耐药突变频率:突变率≥10-8(波动范围±0.5log)
检测范围
1.临床分离菌株:血液/尿液/痰液样本,重点检测ESKAPE病原体(肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等)的多重耐药表型
2.食品动物源菌株:畜禽肠道及肉类样本,侧重tetM/qnrS等可转移耐药基因筛查
3.环境微生物:水体和土壤样本,关注碳青霉烯酶基因(blaNDM/blaKPC)环境传播
4.食品污染物:生乳和即食食品,检测沙门氏菌/弯曲菌对喹诺酮类耐药率
5.益生菌制品:乳酸杆菌/双歧杆菌,排除ermB/tetW耐药基因转移风险
6.医疗器械生物膜:导管/植入物表面,测定生物膜状态下的抗生素渗透性
7.抗感染新材料:抗菌涂层/纳米材料,评估长期使用后诱导耐药性风险
8.兽医临床样本:养殖场分离菌,监测黏菌素耐药基因mcr-1变异
9.制药中间体:抗生素原料药,验证亚抑制浓度耐药诱导效应
10.基因编辑菌株:CRISPR-Cas9改造菌,评估基因敲除后耐药性变化
检测方法
国际标准:
- CLSIM07-A11需氧菌稀释法药敏试验
- EUCAST13.0抗生素折点判定标准
- ISO20776-1:2019实验室药敏测试基本要求
- FDABAMChapter23食源性致病菌耐药检测
- WS/T639-2018抗菌药物敏感性试验技术标准
- GB4789.43-2020食品安全微生物学耐药性测定
- YY/T1726-2020细菌β-内酰胺酶检测试剂盒
- SN/T5364.1-2022出口动物源细菌耐药性检测方法
检测设备
1.全自动药敏仪:VITEK2Compact(检测卡种类≥20种,孵育温度35±0.5℃)
2.微生物比浊仪:DensimatBioMérieux(麦氏标准0.08-0.1,精度±0.01McF)
3.PCR扩增仪:ThermoCyclerPro(升降温速率6℃/s,温控精度±0.2℃)
4.电泳成像系统:GelLogic212Pro(紫外透射波长302nm,像素密度6.5MP)
5.基质辅助激光解析仪:MALDI-TOFMS(质量范围2-20kDa,分辨率≥30000)
6.荧光定量PCR仪:QuantStudio7Pro(检测通道≥5色,灵敏度1拷贝/μL)
7.恒温培养振荡箱:Innova44R(转速范围30-300rpm,温度均一性±0.3℃)
8.自动菌落计数仪:ProtoCOL3(计数范围5-5000CFU,识别误差≤3%)
9.全自动核酸提取仪:MagCoreHF16(通量1-16样本,DNA回收率≥95%)
10.激光共聚焦显微镜:LSM900(Z轴分辨率0.2μm,活细胞成像时长≥72h)
11.生物膜分析仪:BioFlux1000Z(剪切力范围0-20dyn/cm²,微流控通道≥24)
12.超低温冷冻离心机:CR22N(最大RCF100,000×g,温控范围-20℃至40℃)
13.厌氧培养工作站:DG250(氧浓度≤0.1%,湿度控制≥95%)
14.数字PCR系统:QIAcuity(分区数26,000,绝对定量误差±5%)
15.高通量测序仪:MiSeq(读长2×300bp,单次运行数据量≥15Gb)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。