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心脏灌流水脂质代谢试验

检测项目

脂质组分定量:

  • 总胆固醇检测:浓度范围0-10mmol/L(参照NCEP标准)
  • 甘油三酯分析:水平mg/dL(检测限±0.1%)
  • 磷脂含量:μmol/g组织(偏差值±0.05)
脂蛋白亚类分析:
  • 低密度脂蛋白胆固醇:LDL-Cmg/dL(参照AHA指南)
  • 高密度脂蛋白胆固醇:HDL-Cmg/dL(比例范围≥0.4)
脂肪酸谱测定:
  • 饱和脂肪酸比例:百分比(%)(检测精度±0.5%)
  • 不饱和脂肪酸指数:UI值(范围0-10)
  • ω-3脂肪酸含量:mg/g样本(参照ISO5508)
代谢酶活性检测:
  • 肉碱棕榈酰转移酶活性:μmol/min/mg蛋白(活性≥5U)
  • β-羟酰辅酶A脱氢酶活性:nmol/min/mg(偏差±0.1)
氧化应激指标:
  • 丙二醛浓度:nmol/mg蛋白(检测限0.01nmol)
  • 超氧化物歧化酶活性:U/mg蛋白(活性范围10-100)
能量代谢参数:
  • ATP含量:nmol/mg组织(浓度≥2nmol)
  • 乳酸产生率:μmol/min/g(速率范围0-50)
炎症因子分析:
  • TNF-α水平:pg/mL(检测限0.1pg)
  • IL-6浓度:pg/mL(精度±0.05)
细胞凋亡指标:
  • Caspase-3活性:RFU/min(活性值≥100)
  • DNA片段化率:百分比(%)(参照标准方法)
基因表达定量:
  • PPARαmRNA表达量:相对倍数(foldchange)(检测精度±0.01)
  • CPT1B基因转录水平:Ct值(偏差±0.5)
功能性测试:
  • 心脏收缩力变化率:百分比(%)(范围-20至+20)
  • 灌流压力稳定性:kPa(波动≤±0.5)

检测范围

1.离体大鼠心脏组织:重点检测脂质氧化酶活性和能量代谢参数,确保在灌流条件下模拟生理状态。

2.人血清样本:侧重脂质谱分析和炎症因子水平,用于评估系统性代谢变化。

3.心肌细胞培养物:检测脂肪酸摄取效率和凋亡指标,支持体外药物筛选。

4.心脏组织切片:用于组织化学染色分析脂质积累分布,重点关注显微结构。

5.灌流缓冲液样本:分析释放的代谢产物如乳酸和酮体,监测动态代谢流。

6.基因敲除模型心脏:评估特定基因缺失对脂质代谢的影响,侧重CPT-1酶活性变化。

7.药物处理样本:检测药物干预后脂质稳态变化,重点参数包括β氧化速率。

8.病理模型心脏:如糖尿病诱导心脏,侧重脂质毒性指标和氧化应激水平。

9.冷冻组织样本:用于脂质提取和组分定量,确保长期存储样本的稳定性。

10.实时灌流系统:监测动态代谢参数如压力变化和收缩力,支持连续数据采集。

检测方法

国际标准:

  • ISO15197:2013体外诊断测试系统脂质检测方法
  • ASTMF2312-18组织工程产品脂质代谢试验方法
  • ISO5508:1990动植物油脂脂肪酸甲酯气相色谱法
国家标准:
  • GB/T5009.6-2016食品中脂质的测定方法
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价脂质代谢试验
  • GB/T22223-2008食品中脂肪酸的气相色谱测定
方法差异说明:国际标准ISO15197采用荧光法测定脂质,灵敏度为±1%,而国标GB/T5009.6使用气相色谱法,灵敏度差异为±5%;ASTMF2312-18强调动态灌流参数,与GB/T16886.5的静态培养法在样本处理时间上差异达24小时。

检测设备

1.高效液相色谱仪:Agilent1260型(流速范围0.1-10mL/min,检测限0.01ng/mL)

2.气相色谱-质谱联用仪:ThermoScientificISQ型(质量范围10-2000m/z,分辨率0.1Da)

3.荧光显微镜:OlympusBX53型(分辨率0.2μm,放大倍数40-1000X)

4.实时PCR仪:Bio-RadCFX96型(动态范围10^9,温度精度±0.1°C)

5.酶标仪:TecanInfiniteM200型(波长范围200-1000nm,吸光度精度±0.005)

6.离心机:Eppendorf5430型(最大转速15000rpm,容量50mL)

7.灌流系统:RadnotiLangendorff型(流速可调0-20mL/min,压力范围0-200mmHg)

8.组织匀浆器:IKAT10型(转速10000-30000rpm,处理量0.1-100g)

9.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone型(温度-50°C,真空度0.05mbar)

10.电子天平:SartoriusCPA225D型(精度0.01mg,量程220g)

11.pH计:MettlerToledoSevenExcellence型(精度±0.01,范围0-14)

12.恒温箱:MemmertIN110型(温度范围-10°C至100°C,均匀度±0.5°C)

13.超低温冰箱:ThermoScientificForma900型(温度-80°C,容积900L)

14.水浴锅:JulaboSW23型(控温精度±0.1°C,容量23L)

15.数据采集系统:NationalInstrumentsUSB-6009型(采样率48kS/s,通道数8)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

心脏灌流水脂质代谢试验
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。