检测项目

RNA表达分析：

• lncRNA表达量：差异倍数（|log2FC|≥1，参照ENCODE标准）
• miRNA表达量：拷贝数变化（变异系数≤10%，参照miRBase）
• circRNA丰度：RPKM值（范围0.1-100）

细胞活力评估：

• 存活率检测：MTT吸光度（OD值≥0.8）
• 凋亡率分析：AnnexinV阳性率（百分比，参照流式细胞术标准）

炎症因子检测：

• TNF-α浓度：pg/mL（检测限0.1pg/mL）
• IL-6表达：相对定量（倍数变化≥2）

氧化应激指标：

• MDA含量：nmol/mg蛋白（标准曲线R²≥0.99）
• SOD活性：U/mg蛋白（参照ISO21427）

基因表达验证：

• qRT-PCR验证：Ct值（内参基因GAPDH，ΔΔCt法）
• WesternBlot：蛋白表达量（灰度值分析）

信号通路分析：

• PI3K/AKT通路：磷酸化水平（相对强度≥1.5）
• MAPK激活：ERK1/2磷酸化率（百分比）

代谢产物检测：

• ATP含量：μmol/g组织（检测精度±5%）
• 乳酸水平：mmol/L（参照临床生化标准）

形态学观察：

• 细胞形态评分：损伤指数（0-4级）
• 超微结构：线粒体完整性（电镜评级）

功能测试：

• 收缩力测量：峰值力（mN，参照离体灌流系统）
• 钙瞬变：荧光强度（F/F0比值）

生物信息学分析：

• 差异表达基因：P值（≤0.05）
• 通路富集：KEGG富集分数（≥2）

检测范围

1.人源心肌细胞样本：涵盖原代培养细胞，检测重点为缺血再灌注后非编码RNA表达变化及细胞凋亡关联。

2.鼠源心肌细胞样本：包括C57BL/6等品系，侧重灌流模型中lncRNA和miRNA的时序表达分析。

3.猪源心肌细胞样本：用于大型动物模型，重点检测氧化应激指标与RNA表达相关性。

4.体外培养心肌细胞系：如H9c2细胞，检测药物干预下非编码RNA表达差异及活力影响。

5.缺血再灌注模型组织：涵盖离体心脏灌流标本，检测重点为再灌注损伤相关的circRNA丰度变化。

6.药物处理样本：包括抗缺血药物暴露细胞，侧重信号通路激活与RNA表达调控。

7.基因编辑细胞：如CRISPR修饰样本，检测特定非编码RNA敲除后的功能表型及表达恢复。

8.临床患者心肌活检：来自冠心病患者，重点分析miRNA表达谱与临床病理参数关联。

9.动物模型心肌组织：如心梗模型，检测灌流后炎症因子与lncRNA共表达网络。

10.细胞共培养系统：心肌细胞与内皮细胞共培养，侧重细胞间通讯相关的非编码RNA表达。

检测方法

国际标准：

• ISO20184-1:2020高通量RNA测序方法（采用Illumina平台）
• ENISO10993-5:2020细胞活力检测（MTT法）
• ISO21427:2006氧化应激生物标志物分析（SOD活性测定）
• ISO15197:2013炎症因子ELISA检测（灵敏度要求0.1pg/mL）

国家标准：

• GB/T37868-2019RNA提取与纯化（柱离心法）
• GB/T16886.5-2017细胞凋亡检测（流式细胞术）
• GB/T5009.124-2016代谢产物测定（ATP生物发光法）
• GB/T30987-2020基因表达qRT-PCR验证（ΔΔCt计算）

方法差异说明：ISO标准强调高通量测序的深度覆盖（≥30Mreads），而GB标准注重样本前处理步骤；国际标准使用ENCODE数据库参照，国家标准采用本土化生物信息学流程；在细胞活力检测中，ISO规定OD值校准，GB细化MTT试剂浓度控制。

检测设备

1.高通量测序仪：IlluminaNovaSeq6000（通量20Breads/run，错误率≤0.1%）

2.实时荧光定量PCR仪：AppliedBiosystemsQuantStudio7（动态范围10^8，精度±0.2Ct）

3.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（检测通道18个，流速12μL/min）

4.酶标仪：BioTekSynergyH1（波长范围200-999nm，分辨率1nm）

5.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN-100（最大转速100,000rpm，温控±0.5°C）

6.电化学发光检测仪：MesoScaleDiscoveryS600（灵敏度0.01pg/mL，多因子同步）

7.倒置显微镜：OlympusIX83（放大倍数1000X，CCD分辨率5MP）

8.透射电镜：JEOLJEM-1400Plus（分辨率0.2nm，加速电压120kV）

9.生物分析仪：Agilent2100Bioanalyzer（RNA完整性数RIN≥8.0）

10.离体灌流系统：ADInstrumentsLangendorff（灌流压80mmHg，流速10mL/min）

11.蛋白印迹系统：Bio-RadChemiDocMP（检测限0.1ng，线性范围6logs）

12.微孔板处理器：HamiltonMicrolabSTAR（加样精度±1μL，通量96孔）

13.低温存储箱：ThermoScientificForma-86°C（温度稳定性±1°C，容量800L）

14.生物安全柜：EscoAirstreamClassII（风速0.5m/s，HEPA过滤）

15.荧光显微镜：NikonEclipseTi2（激发波长400-700nm，共聚焦模块）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。